临床输血检验技术、社会服务模块 ABO血型鉴定、技术文档 ABO、Rh（D）血型鉴定操作规程.doc

襄阳市中心血站 操作规程 版本：6 修改状态：0 文件编号：XBC/SOP-SL-33 生效日期：2016年1月1日 文件名称：ABO、Rh（D）血型鉴定操作规程 第 PAGE 8 页 共 NUMPAGES 8 页 受控状态： 控制编号： ABO、Rh（D）血型鉴定操作规程 1 目的 规范ABO、Rh（D）血型鉴定的操作，确保鉴定结果的准确性。 2 适用范围 适用于检验科样本的ABO、Rh（D）血型鉴定。 3 职责 血型检测人员 负责实验操作、结果核对、结果分析、数据接收； 负责Rh（D）阴性及疑难血型的送检； 负责质管科反馈结果报告的接收。 4 实施程序 4.1 原理 4.1.1 ABO血型正定型 根据红细胞上有无A抗原或/和B抗原，将血型分为A、B、O、AB 4种。根据IgM类特异性血型抗体与红细胞上特异性抗原结合能够出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准血清与被检红细胞在室温条件下、盐水介质中反应，若被检红细胞出现凝集现象，表明被检红细胞上有与血型抗体对应的抗原。 4.1.2 ABO血型反定型 用已知标准A、B、O型红细胞与被检血浆/血清反应，若被检血浆/血清与已知型别的标准红细胞出现凝集，则证明被检血浆/血清中存在着该红细胞对应的抗体。反之，若被检血浆/血清与已知型别的标准红细胞不出现凝集，证明被检血浆/血清中不存在与红细胞抗原对应的血型抗体，以此反证被检者红细胞上抗原的型别。 4.1.3 Rh（D）血型 Rh（D）血型是由红细胞表面存在或缺失D抗原确定。凡被检红细胞和抗D血清凝集为RhD(＋)，不凝集为RhD(-)。 4.2 仪器 Metis全自动血型仪为血型常规检测设备， Poseidom AK03B全自动血型仪为备用设备，Metis故障或其它原因不能使用时启用Poseidom AK03B全自动血型仪。全自动血型仪判读后，弱凝集、正反定型不符等有疑问的样本或RhD(-)样本，使用试管法确认。 4.3 实验过程 4. 样本信息 4.3.1 样本采用≥5ml的EDTA-K2真空采血管留取血液样本。 4.3.1. 样本的保存：2℃-8℃ 4.3.1. 样本的准备：将试管载架按批次放于仪器样管扫描区。 4.3.2 Metis全自动血型系统 4.3.2.1 试剂种类：ABO标准血清、ABO标准红细胞、Rh（D）血清试剂。 4.3.2.2 试剂的准备 a.试剂的平衡：依据检测样本数量从试剂保存冰箱内取出试剂盒、试剂槽，平衡至室温。 b.试剂盒的检查：检查试剂盒完整性，查看有无破损；试剂有无更换批号，是否在有效期内；各试剂瓶有无渗漏，试剂瓶标签是否完整。 c.试剂的添装：将各种试剂装入相应的试剂槽中。抗血清试剂配制方法：抗A、抗B试剂用原液，抗D试剂与生理盐水按1：1比例稀释。标准红细胞的配制方法：市售红细胞可直接用于试验；自制红细胞分别选取已定型A、B、O型红细胞各3份，各自同型混合后，用生理盐水洗涤（3000转/分离心3分钟）三次，得压积红细胞，分别制成1.5%的A、B、O型标准红细胞，填写《标准红细胞配制及确认记录》。中和洗液的配制方法：取2支以上AB型样本，加盐水配制成5%的混合红细胞悬液。 d.血型试剂符合性实验：将抗A试剂、抗B试剂各2滴，分别加到滴加了A细胞、B细胞、O细胞U型板孔中，将抗D试剂2滴加到滴加了Rh(D)阳性红细胞、Rh(D)阴性红细胞U型板孔中，在《血型试剂符合性记录》中填写反应结果，与标准结果对比，血型试剂符合性实验正常，该试剂可以使用。实验异常，查找原因，试剂不可使用。 ⑸使用市售质控物,质控物的要求见《检验科室内质量控制操作规程》。 4.3.2. 仪器的准备 a.打开Metis电源开关，电源指示灯亮；打开电脑。 b.准备足够数量的稀释板、反应板。 c.添加生理盐水、系统液，系统液用1%decon90洗液（25mldecon90原液加入装满去离子水的专用系统液桶中）。 d.初始化仪器，并进行日维护。具体操作见《Metis全自动血型仪使用及维护操作规程》。 4.3.2. 实验步骤 a.具体操作见《Metis全自动血型仪使用及维护操作规程》。 b.操作人员逐一核对全自动血型仪的判定结果与图像、微板相应孔位显示的结果，如有疑问用试管法重复试验，核对无误后修正检测结果并打印报告单。复核者对图像、微板、手工试验结果、报告单再次进行核对。 c.操作人员与复核者对样本标识血型、条码和报告单结果及条码进行核对，不一致的样本用试管法确定结果。 d.输出结果。 4.3.3 Poseidom AK03B全自动血型仪 4.3.3.1 试剂种类见4.3.2.1。 4.3.3.2 试剂准备 a.见4.3.2.2.a。 b.见4.3.2.2.b。 c.试剂的添装：将各种试剂装入相应的试