乙醇检测作业指导书 （新）.pdf

乙醇检测作业指导书 （新） 页 号 第 1 页 共 2 页 绍兴文理学院司法鉴定中心作业指导书 修改次数 第 1 次修改 审 核 人 刘 正 标题 血液中乙醇的检测作业指导书 批 准 人 葛建荣 实施日期 2012 年 9 月 1 日 1．目的 检测血液中乙醇含量。 2. 适用范围 本标准适用于血液中乙醇的定性、定量分析。 3. 职责 技术负责人批准考核合格的毒物分析专业人员完成此项工作。 4. 试剂与对照品 4.1 乙醇（色谱纯 99%，Sigma） 4.2 乙醇溶液：精密称取乙醇 1.0097g 于 100ml 容量瓶内，添加蒸馏水至刻度， 混匀，得 10.00mg/ml 乙醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至 20 倍，得 0.50mg/ml 乙醇控制液，放置样品室 4℃冰箱保存，有效期为 6 个月。 4.3 叔丁醇（色谱纯 99%，Chem Service） 4.4 内标叔丁醇溶液：精密称取叔丁醇 0.5026g 于 100ml 容量瓶内，添加蒸馏 水至刻度，混匀，得 5.00mg/ml 叔丁醇储备液，将储备液用蒸馏水稀释至 125 倍， 得 40ug/ml 叔丁醇内标工作液，放置样品室 4℃冰箱保存，有效期为 6 个月。 4.5 乙醇标准溶液（Gerilliant） 乙醇标准溶液： 10mg/dl，20mg/dl，50mg/dl，80mg/dl，100mg/dl，200mg/dl， 300mg/dl 5.血液中乙醇定性、定量的分析 5.1 样品处理 用精密移液器取样品血 0.10mL 及 0.50mL 叔丁醇 40 μg/mL 内标工作液2 份， 各加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀，置于顶空自动进样 器中加热 10 min，待测。 5.2 气相色谱仪条件 第 1 页 乙醇检测作业指导书 （新） 色谱柱：DB-ALC1 毛细管柱（30m0.32mm1.2m） 柱温：恒温 40C 检测器：火焰离子化检测器（FID） 检测器温度：250C 进样口温度：150C 5.3 顶空自动进样分析条件 DANI 顶空自动进样器 (配 1mL 定量进样环)工作条件：加热箱温度（Oven）65 ℃，定量环温度 105℃，传输线温度（TR.Line）110℃，样品瓶加热平衡时间 （Vial EQ.Time）10.0min，样品瓶加压时间（Pressuriz Time）0.10min，定量 环充满时间（Loop Fill Time）0.10min，定量环平衡时间 0.05min，进样时间 （Inject Time）1.00min。 5.4 记录 记录检材中色谱峰乙醇及内标物的峰面积值，填入表中，并根据工作曲线定 量计算方程计算出样品血中乙醇的浓度。 5.5 定量结果评价 样品应同时平行测定两份，单柱单检测器两份样品测定结果的双样相对相差 （双柱双检测器两份样品测定结果的相对偏差）若不超过 5％时（有凝血块的血 样不超过 10％），结果按两份样品结果的平均值计算，双样相对相差若超过 5％时 （有凝血块的血样超过 10％），需要重新测定。 | C - C | 1 2 双样相对相差（%） =   100 C C 、C 为两份样品平行定量测定的结果。 1