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多项肿瘤标志物蛋白芯片检测系统的实验对比和临床应用介绍
陆汉魁高云朝顾建英钱晓煜
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上海交通大学附属第六人民医院核医学科 上海200233
摘6《V全国免疫学与分了生物学技术新进展研讨会暨新技术培训班〉论文汇编》
前言
多项肿瘤标志物生物芯片检测系统(简称C12芯片)是利用生物芯片技术 的并行检测能力,在尚相基础上预置了 12种肿瘤标志物(或肿瘤相关物质)对 应的单克隆抗体用于俘获被测血清屮对应的肿瘤标志物,对免疫复合物进行酶促 光化学反应产生光信号,测光系统根据光信号强度进行线形定量分析,一次检测 可以获得 AFP、NSE、PSA、fPSA、CEA、CA125、CA242、CAI5-3CAI9-9 P-HCG HGH和铁蛋白共12项指标的含量。这是免疫检测技术方面的一个重 要的发展,而且是具有国内自主知识产权的新技术和新产殆。
该系统是由上海铭源数康生物科技公司研究开发并逐渐投入临床应用,对此 国内己经有许多相关的临床研究报告,这些研究显示该系统具有相当高的临床实 用价值,同吋也有一些技术问题需要进一步发展和完善。我们对该系统也进行了 ―系列的初步实验研究和临床研究。本报告介绍C12芯片在临床应用情况,同 吋报告部分02的单指标(C6)与冃前临床常用的全自动化学发光免疫分析方 法(ALICA)的比较研究结果,并对H前的技术发展和临床应用方面的问题提出一 些初步的意见和建议。
资料与方法
1?对比研究 应用C12屮选择的项H(C-6)检测系统进行测试我们实验室 己完成常规检测的临床样品。样品来源包括各种类型的恶性肿瘤、良性疾病以及 表面健康人的血清样品,其屮表面止常人126例,均经过门诊全面健康检查排除 肿瘤以及与肿瘤相关的良性疾病;各种类型恶性肿瘤168例,均有明确的肿瘤病 史和病理诊断结果,肺癌53例,肝细胞性肝癌17例,直结肠癌49例,乳腺癌 32例,胰腺癌19例。对所有血清样殆均进行?40°C或?80°C保存,在进行比对实 验过程屮各对应项H均一次完成。系统对比项H包括? CA19?9(肿瘤抗原199)、 CA12?5(肿瘤抗原125)、AFP (甲胎蛋白)、CEA (癌胚抗原)、SCC (鳞癌相关 抗原)和CK19 (细胞角蛋白19片段,与Roche的电化学发光自动检测ELICA 项 R Cyfra21-1 相对应)。单项 ACLIA 检测 AFP、CEA 和 SCC 采用 ABBOT i2000 检测系统,检测CA19-9. CA125和Cyfra21-1则采用Roche电化学发光自动检 测系统。06联合检测方法同下述的C12检测;而单指标检测方法基本同实验室 常规检测(方法略),各项指标的定标曲线和实验室内质控均在可控范用内。对 比实验的正常参考范围值见表k对单项检测结果超过常规检测范围的样品均进 行自动稀释测量,而C-6联合检测超过检测范围者进行正常人混血清进行稀释, 稀释倍数分别为1:5, 1:10, 1:20和1:50。
表1六项肿瘤标志物二种方法对比检测的参考值
检测项目
单指标检测方法
参考范围
C-6参考范围
CA19-9
Roche Elecsys 2010
37. 0 u/ml
35. 0 u/ml
CEA
ABBOT T2000
5.0 ng/ml
5.0 ng/ml
SCC
ABBOT 12000
2.9 ng/ml
2. 5 ng/ml
AFP
ABBOT 12000
20.0 ng/ml
20.0 ng/ml
CK19
(cyfra211)
Roche Elecsys 2010
3.3 ng/ml
3. 3 ng/ml
CA125
Roche Elecsys 2010
〈35. 0 u/ml
35. 0 u/ml
2?临床资料采用C12芯片进行阳性肿瘤标志物筛查。检查对象为门诊怀疑
肿瘤需要进行多种检查排除,或老年住院病人以及临床怀疑有恶性肿瘤征象需要 排除常见恶性肿瘤者,或临床初步诊断为肿瘤需要筛查肿瘤标志物阳性指标,以 及本院职工每年接受常规体格检查并具备随访条件者。具备相关临床资料的累计 检查人数为9232例,凡C12芯片检测结果屮单项或多项出现异常升高的指标均 采用常规免疫检查方法进行复检。临床和随访资料统计病例屮,确诊为恶性肿瘤 者441例;其他经过相关检查诊断为良性疾病或者经过一?年以丄阳性单项的指标 连续检测排除恶性肿瘤。恶性肿瘤患者屮:肝癌(原发性肝细胞肝癌)41例, 直结肠癌66例,前列腺癌53例,卵巢癌29例,胰腺癌31例,胆管癌13例, 乳腺癌39例,胃癌43例,肺癌47例,淋巴瘤28例,膀胱癌16例
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