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水 稻 花 粉 镜 检
通过花粉活力的测定,可以了解花粉的可育性,并掌握不育花粉的形态和生理特征。在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力鉴定。掌握花粉活力的快速测定方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。 Ⅰ、碘-碘化钾染色法 ??? 多数植物正常花粉呈规则形状,如圆球形或椭球形、多面体等,并积累淀粉较多,通常I2-KI可将其染成蓝色。发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,用I2-KI染色,往往呈现黄褐色。因此,可用I2-KI溶液染色法测定花粉活力。 一、仪器、药品与材料 (一)实验材料 ??? 各种着生花芽的植物枝条,花芽要充分发育并已含苞待放。 (二)仪器与用品??? 显微镜,恒温箱,镊子,载玻片,盖玻片。 (三)试剂 ??? I2-KI溶液:取 2 g KI 溶于5~10 mL蒸馏水中,然后加入1 g I2,待全部溶解后,再加蒸馏水定容至300 mL。贮于棕色瓶中备用。 二、实验步骤 ??? 1.花粉采集:取充分成熟将要开花的花蕾,剥除花被片等,取出花药。 ??? 2.镜检:取一花药置于载玻片上,加 1 滴蒸馏水,用镊子将花药充分捣碎,使花粉粒释放,再加 1~2 滴I2- KI溶液,盖上盖玻片,于低倍显微镜下观察。凡被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。观察 2~3 张装片,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的育性。 ???? 注:此法不能准确表示花粉的活力,也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。因为核期退化的花粉已有淀粉积累,遇 I2-KI呈蓝色反应。另外,含有淀粉而被杀死的花粒遇I2-KI 也呈蓝色。
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