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谷氨酰胺转移酶(TGase) 及其对鱼糜制品凝胶特性的影响 Index Page ? * TGase的来源及生产制备 1 TGase的酶学特性 2 TGase对鱼糜制品凝胶特性的影响 3 TGase的应用展望 4 1. TGase的来源及生产制备 Page ? * Catalogue Page ? * Production and preparation Nomenclature Distribution Types TGase是一种催化酰基转移反应的酶 催化蛋白质分子内或分子间的交联 催化蛋白质和氨基酸之间的连接 催化蛋白质分子内谷氨酰胺残基的水解 主要作用 改善蛋白质功能性质 提高蛋白质营养价值 “21世纪超级粘合剂” 应用领域:食品、医药、纺织、化妆品等 Page ? * Nomenclature 系统命名 蛋白质-谷氨酰胺-γ-谷氨酰胺转移酶,EC2.3.2.13 英文名 transglutaminases,TGase 中文名 谷氨酰胺转移酶 转谷氨酰胺酶 谷氨酰胺转胺酶 谷氨酰胺转氨酶 Page ? * Distribution Mammal (Folk and Chung , 1985) 几乎所有组织和器官 组织TGase,膜结合TGase,血浆TGase Plants (Icekson and Apelbaum, 1987) 细胞骨架、细胞壁结构中 Fish (Yasueda and others, 1994) 同哺乳动物,几乎所有组织和器官 Bacteria (Ando and others, 1989) 链霉菌属(Streptomyces spp.) 芽孢杆菌属(Bacillus spp.) Page ? * Types 根据来源不同: 组织谷氨酰胺转移酶(TTGase) 微生物谷氨酰胺转移酶(MTGase) 共同点: 底物类型相似 活性中心都含有Cys残基 活性中心氨基酸序列大致相同 不同点: 同源性 酶学特性(分子量、反应条件等) Page ? * Superiority of MTGase TTGase 来源少,主要取自动物肝脏 量少,纯度低 复杂的分离纯化程序 价格高昂 MTGase 来源简单,可以大规模生产 热稳定性、酸碱耐受性高 不依赖于Ca2+激活 更易于保存 Page ? * Production and preparation Page ? * Production and preparation Production and preparation 1959年,Waeksch等最早分离出TGase,从豚鼠肝脏中分离出来 长期以来,猪肝脏一直是TGase的唯一来源,使TGase的价格相当昂贵,无法用于大规模食品加工 1989年,Ando等人土壤中筛选出Streptovercillium S-8112菌株,发现它可以产生MTGase Page ? * 1993年,日本味之素公司利用该菌株以发酵法生产出MTGase,开发出了TG-K、TG-S、TG-B三个TGase酶制剂品种,并投放市场,使TGase在食品工业中迅速发展 国内学者开始研究具有自主知识产权的优良菌株,主要采用三种方法:诱变育种、优化发酵条件和基因工程改造菌种 2003年,王璋等使用神舟4号飞船搭载进行空间诱变育种,选育出突变的高产菌株 目前国内研发的菌株存在的主要问题:产酶量低、稳定性差、酶活不高、成本昂贵 Page ? * Production and preparation 2. TGase的酶学特性 Page ? * Contents Page ? * Structure Reaction mechanism Reaction conditions Influencing factors 酶学特性 Structure Page ? * 三种来源的TGase的结构示意图 红海鲷TGase 人凝血因子XIII MTGase Reaction mechanism (1)酰基转移反应 酰基供体: γ-羧酸酰胺基 酰基受体:伯氨基 作用:可以使蛋白质连接限制性氨基酸 应用:提高蛋白质营养价值 Page ? * Reaction mechanism (2)蛋白质交联反应 酰基供体: γ-羧酸酰胺基 酰基受体:Lys残基的ε-氨基 作用:使蛋白质分子发生交联 应用:改变食物质地和结构,改善蛋白质 的物理性质 Page ? * Reaction mechanism (3)脱酰胺反应 酰基供体: γ-羧酸酰胺基 酰基受体:水 作用:脱酰胺形成谷氨酸残基 应用:改变蛋白质等电点和溶解度,改善食品风味 Page ?
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