临床病理知识及病理学常用新技术.doc

—?大纲要求 掌握临床病理检杳的种类及日的；掌握临床病理检查的的流稈及注意事项；.熟悉病理学常用 新技术的原理及应用 二.基木内容 (―).基本概念 活体组织检5 (biopsy)：简称“活检”，从活体身上的病变或可疑病变处采取小块组织作 病理检查，以明确病变的性质。 2?冰冻切片快速诊断(frozen sextion):用不经固定的新鲜标本，快速冷冻至-18度以下, 进行切片、HE染色，一般在20?30min内完成定性诊断。 细胞学检杳(cytology)：通过对患者病变部位脱落、刮取和穿刺抽取的细胞进行病理形 态学的观察，并作出定性诊断。H前主要用于肿瘤的诊断，判断有无肿瘤细胞，是良性或恶 性。也用于某些内部器官炎症性疾病的诊断和激素水平的判定等。 苏木素一伊红染色(IIE染色)：被称为常规染色方法，能较好地显示纽?织结构和细胞形态, 可用于观察、描述正常和病变组织的形态学。而且HE切片可较长时间保存，因而是生物学和 医学领域屮嚴基木也是应用最广泛的染色方法。染色结果：细胞核呈蓝色，胞质、肌肉、结 缔组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同稈度的红色。钙盐和微生物也可染成蓝色或蓝紫色 组织化学技术(histochemistry technique)：又称特殊染色，其基本原理是利用病变组 织内某些物质的化学特性，用特殊染料将它们显示出来，从而协助鉴别HE染片内不易区别的 病变或物质。 免疫组织化学(immunohistochemistry)：根据抗原抗体特异性结合的免疫学原理，将预先 制备的特异性抗体加在组织切片上，使之与相应的抗原结合。特异性抗体通过某种方式连结 辣根过氧化酶或碱性磷酸酶。显色剂在酶的作川下氧化沉淀，将抗体所检测的抗原在纽?织切 片上显示出来。 生物芯片技术(biochip technique):是将大量具有生物识别功能的分了或生物样品有序 的点阵扌非列在支持物上并与标记的检测分了同时反应或杂交，通过放射H显煤、荧光扫描、 化学发光或酶标显示可获得大量有用的生物信息的新技术。 基因芯片(gene chip)：是指采用原位合成或显微打印方法，将大：1 DNA探针固化于支持 物表面上，产生二维DNA探针阵列，然后与标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号来实现 对生物样品快速、高效的检测。 组织芯片(tissue chip)：又称组织微列阵(tissue microarray),是将数十个、数百个乃 至上千个小的组织片整齐地排列在某一载体(通常是载玻片)而成的微缩组织片。 荧光原位分了杂交染色体分析技术(FISH)：是应川荧光标记物标记已知碱基序列的核酸 分了作为探针，与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合而形成杂交体, 从而对组织、细胞屮待测的核酸进行定性、定位和相对定量分析的一种研究方法。应用不同 的探针可显示某一种物种的全部基因、某一染色体染色片段及单拷贝序列，结合共聚焦激光 显微镜可对间期核及染色体进行三维结构研究。 11?比较基因组杂交技术(CGII)：基本原理用不同的荧光染料分别标记正常人基因ai. DNA与 肿瘤细胞DNA,然示与正常人屮期染色体杂交，通过检测染色体上两种荧光(红、绿)的相 对强度比率，两种DNA相异部分会显出颜色偏移，可计算出DNA的缺失与放大，从而了解肿 瘤组织DNA拷贝数的改变，并能同时在染色体上定位。 流式细胞技术(FCM)：是一种单细胞定量分析和分选的技术，可对单个细胞逐个地进行 高速准确的定量分析和分类。 原代培养(primary culture)：由体内真接取出组织或细胞进行培养。 传代培养（subculture）：把细胞白原代培养的培养瓶屮分离、稀释，而移至另一新的培 养瓶中的操作程序，即为传代或再培养，以便持续培养，得到大量同种细胞或建成细胞株， 维持细胞种延续。 蛋白质纟R（proteome）:指基因组表达的全部蛋白质及其存在方式。 蛋白质纟R学（proteomics）：蛋白质纟ft学旨在阐明生物体全部蛋白质的表达模式及功能模 式。其内容包括鉴定蛋白质的表达、存在方式（修饰方式）、结构、功能和相互作用等。 （二）?临床病理基本知识 1活体纟R织检杏要注意：①取准病灶；②不能过分挤压组织；③避免送检坏死组织；④ 活检不能用电灼取材。 2活检的分类及目的：活检分三类： ⑴术前活检：在治疗性手术前或其它治疗（如放疗或化疗）前所作的活检。常规甲醛固定， 石蜡包埋，IIE染色，需3?7天才能发报告。 ⑵术屮活检：在治疗性手术或探杏性手术进行屮所作的活检。用不同定的新鲜标木快速冷冻 切片，20?30min内完成定性诊断，以便指导手术的进行。其准确率仅在80%左右，不及石 蜡切片。其bl的：①确定病变的性质，以便确定手术方案；②了解病变的情况，以便确定手 术的范围；③确定所