分析化学课件第18章 经典液相色谱法 正式.ppt

第18章 经典液相色谱法 第18章 经典液相色谱法 18.1概述 济众酊质量标准草案 济众酊 Jizhong Ding 【处方】 樟脑 12g 薄荷脑 6g 肉桂 10g 砂仁 10g 辣椒 2.5g 大黄 10g 广藿香 40g 干姜 30g 小茴香 30g 【制法】 以上九味，樟脑、薄荷脑用适量乙醇溶解，其余砂仁等七味照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法（《中国药典》2005版一部附录I O），用70％乙醇作溶剂进行渗漉，收集渗漉液约900ml，压出药渣中的溶剂，合并，加入樟脑、薄荷脑的乙醇溶液，加70％乙醇使成980ml，静置，滤过，加乙醇使成1000ml，混匀，即得。 大黄的TLC鉴别： 取本品30ml，加水10ml，用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚层，7水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.5g，加甲醇20ml，超声处理25分钟，滤过，挥干至2ml作为对照药材溶液。另取缺大黄的阴性样品，按供试品制备方法同法制成阴性对照溶液。取大黄素、大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素对照品，加乙醇制成浓度均为1.5mg/ml的溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2005版一部附录VI B）试验，分别吸取上述对照品溶液和对照药材溶液各4μl，供试品溶液2μl以及阴性溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-甲酸（30：10：0.5）为展开剂，展开，展距约8cm，取出，晾干，置紫外灯（254 nm＋310 nm＋365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，且各斑点分离较好，阴性对照色谱在相应位置上无干扰。 大黄TLC图谱 S1：大黄酚，大黄素，大黄酸，芦荟大黄素（依次从上到下）对照品 S：大黄对照药材 1，2，3，4，5：供试品 B：阴性对照品 S1 S 1 2 3 4 5 B 18.2 液-固吸附柱色谱法 18.2 液-固吸附柱色谱法 18.2.2 吸附剂 18.2.2 吸附剂 18.2.2 吸附剂 18.2.2 吸附剂 18.2.2 吸附剂 18.2.3 色谱条件的选择 18.2.3 色谱条件的选择 18.2.3 色谱条件的选择 18.2.3 色谱条件的选择 18.2.3 色谱条件的选择 18.3 离子交换柱色谱法 18.3.1 离子交换剂 18.3.1 离子交换剂 18.3.1 离子交换剂 18.3.1 离子交换剂 阴离子交换树脂 树脂骨架上引入碱性基团，如季铵基-N(CH3)3+、 胺基-NH2、仲胺基-NHCH3和叔胺基-N(CH3)2等， 这 些碱性基团上的OH-可以和溶液中的阴离子发生交换 反应。常用的阴离子交换树脂多为强碱型，例如季铵 基阴离子交换树脂，以R-N(CH3)3+OH-表示，其交换 与再生反应为 交换 n R-N(CH3)3+OH- + Y n- (R-N(CH3)3+ )n Y n-+ n OH- 再生 18.3.2 离子交换树脂的性能 交联度(degree of cross linking) 树脂中交联剂所占的质量分数。交联度大，网眼就 小，形成的网状结构紧密，选择性高。但网眼过小，会 使交换速度变慢，甚至使体积较大的离子难以进入树脂 进行交换反应。 交换容量(exchange capacity) 理论交换容量是指每克干树脂内所含有的能与离子发 生交换的基团数目； 实际交换容量是指在实验条件下每克干树脂真正参加 交换反应的基团数。 薄层色谱法(thin layer chromatography TLC) 18.4 平面色谱参数 18.4.1 定性参数 18