肠道菌増菌液体培养基适用性验证方案.doc

肠道菌増菌液体培养基适用性验证方案 题目：肠道菌増菌液体培养基适用性检查方案 第1 1页 共5页 编号：YB-STP-09-003 起草： 日期：年 月 日 版本：1 审核： 日期：年 月 日 颁发部门：质量部 执行日期： 年 月曰 分发部门：质量部、化验室 标准依据：《中国药典》2015年版四部 目的：验证肠道菌増菌液体培养基适合控制菌检查；验证同一厂家，不同批号，对培养基适用性 无明显差界。 范围：肠道菌増菌液体培养基。 内容： 概述 培养基质量是影响微生物检验结果的重要环节。控制菌检查用培养基由于其促生长能力、指 示能力、抑制能力的差异，从而对菌落颜色、形态等指标存在较大差异，影响结果判断的客观 性。 培养基适用性检查是通过检验用培养基与对照培养基的比较，以阳性菌的生长状态或特征來 评价判断检验用培养基是否符合检验要求。 验证原因 按2()15版《中国药典》微生物限度检验要求。 验证过程 3.1验证人员： 组长： 组员： 3.2验证时间 年 月口至 年 月口 题冃：肠道菌増菌液体培养基适用性检查方案 第2页共5页  编号：YB-STP-09-003 版本：1 3.3验证用仪器 仪器名称 型号 生产厂家 生化培养箱 SPX-250B-Z 上海博讯实业有限公司 洁净工作台 JB-CJ-1FX 苏州佳宝净化工程设备有限公司 立式压力蒸汽灭菌器 BXM-30R 上海博讯实业有限公司医疗设备厂 3.4验证用培养基及试剂 培养基名称 批号 生产厂家 膜酪大豆月东液体培养基 上海盛思生化科技有限公司 肠道菌増菌液体培养基 上海盛思生化科技有限公司 肠道菌増菌液体对照培养基 中国食品药品检定研究院 0.9%无菌氯化钠溶液 3.5验证用菌种 菌种名字 来源 编号 大肠埃希菌 北京三药科技开发公司 [ATCC 25 922] 金黄色葡萄球菌 北京三药科技开发公司 [CMCC (B) 26 003] 铜绿假单胞菌 北京三药科技开发公司 [CMCC (B) 10 104] 3.6菌液制备 接种大肠埃希菌的新鲜培养物至10ml胰酪大豆陈液体培养基中，在32°C培养24小时，然后 用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至毎1ml含菌数小于lOOcfu的菌悬液。 接种铜绿假单胞菌的新鲜培养物至10ml胰酪大豆陈液体培养基中，在32°C培养24小时，然 后用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至每Iml含菌数小于lOOcfu的菌悬液。 接种金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至10ml胰酪大豆陈液体培养基中，在32°C培养24小时， 然后用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至每1ml含菌数小于lOOcfu的菌悬液。 题目：肠道菌増菌液体培养基适用性检查方案 第3页共5页 编号：YB-STP-09-003 版本：1 3.7适用性检查 3.7.1准备七个微生物培养试管，分别编号1、2、3、4、5、6、7。取2ml大肠埃希菌菌悬液 分别注入1号跟2号培养管中（每管lml）,再分别加入10ml肠道菌増菌液体培养基；取2ml金 黄色葡萄球菌菌悬液分别注入3号跟4号培养管中（每管lml）,再分别加入1（）曲肠道菌増菌液 体培养基；取2ml铜绿假单胞菌菌悬液分别注入5号跟6号培养管中（每管lml）,再分别加入 10ml肠道菌増菌液体培养慕；7号加入lml0.9%无菌氯化钠溶液，再加入10ml肠道菌増菌液体培 养基作为对照。摇匀，32°C培养24小时。 3.7.2准备七个微生物培养试管，分别编号A、B、C、D、E、F、G。取2ml大肠埃希菌菌悬 液分别注入A跟B培养管中（每管lml）,再分别加入10ml肠道菌増菌液体对照培养基；取2ml 金黄色葡萄球菌菌悬液分别注入C跟D培养管中（每管lml）,再分别加入10ml肠道菌増菌液 体对照培养基；取2ml铜绿假单胞菌菌悬液分别注入E跟F培养管中（每管lml）,再分别加入 10ml肠道菌増菌液体对照培养基；G加入1 ml（）.9%无菌氯化钠溶液，再加入10ml肠道菌増菌液 体对照培养基作为对照。摇匀，32°C培养24小时。 题冃：肠道菌増菌液体培养基适用性检查方案 第4页共5页 编号：YB-STP-09-003 版本：1 3.8检查结果 RV沙门増菌液体培养基的适用性检查结果如下 培养基 类型 菌种 类型 培养管 编号 检查结果 促生长能力（浑浊） 抑制能力（澄清） 肠道菌増菌液 体培养基 大肠埃希 菌 1 2 金黄色葡萄 球菌 3 4 铜绿假单 胞菌 5 6 空白对照 7 肠道菌増菌液 体对照培养基 大肠埃希 菌 A B 金黄色葡萄 球菌 C D 铜绿假单 胞菌 E F 空白对照 G 结果判定 根据上面的数据，可以看出肠道菌増菌液体培养基加入大肠埃希菌后变 ;加入金黄色 葡萄球菌后变 :加入铜绿假单胞菌后变 O与肠道菌増菌液体对照培养基变化