生物化学：02蛋白质化学1.ppt

肽链的拆分 非共价键：变性剂 共价键：二硫键 过甲酸氧化法 还原法 （防止重新氧化） 肽链的部分水解 化学法：溴化氰(CNBr)法 酶法：胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 胃蛋白酶 溴化氰（CNBr）裂解法 肽酰高丝酸内酯 专一水解甲硫氨酸羧基形成的肽键 胰蛋白酶Trypsin Lys-Pro Arg-Pro 胰凝乳蛋白酶/糜蛋白酶（chymotrypsin）：芳香族氨基酸的羧基端 ( Phe，Tyr， Trp ，不于Pro相连) 胃蛋白酶（pepsin）：断裂键的两端均为疏水氨基酸( Leu-Val) 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶/糜蛋白酶 嗜热菌蛋白酶 胃蛋白酶 弹性蛋白酶 内肽酶 片段重叠法 N -A-B-C-D-E-F-G-H-M-N- C ↑ ↑ ↑ ↑ 酶1 A-B-C-D E-F-G H-M-N 酶2 A-B-C D-E-F G-H-M-N 二硫键的定位 ——对角线电泳 过甲酸 练习 12肽 胰蛋白酶水解： Phe-Ala-Lys，Ser-Glu-Asn， Ala-Ile-Tyr-Met-Gly-Arg 胰凝乳蛋白酶水解： Met-Gly-Arg-Phe，Ala-Ile-Try， Ala-Lys-Ser-Glu-Asn Ala-Ile-Try- Met-Gly-Arg-Phe-Ala-Lys-Ser-Glu-Asn 肽链完全水解： Met，Pro，Phe，Glu，2xLys，NH3 FDNB：DNP-Phe CNBr：2肽高丝氨酸内酯，4肽 胰蛋白酶：2 x 3肽 羧肽酶A、B均阴性 →Gln →N-Phe →N-Phe-Met →N-Phe-Met-Lys →Pro-Lys-C Phe-Met-Lys-Gln-Pro-Lys * 脂肪烃侧链氨基酸：甘氨酸，丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸 芳香环氨基酸：苯丙氨酸，色氨酸 亚氨基酸：脯氨酸 含硫氨基酸：甲硫氨酸 * 较非极性R基氨基酸易溶于水，侧链含不解离极性基（羟基，酰胺基，巯基）可与水成氢键。 * 生理pH 精氨酸：胍基；组氨酸：咪唑 * 平面偏振光： 光线通过尼科尔Nicol棱镜，变为只在一个平面振动的光，称为平面偏振光。 物质的旋光性：使偏振光旋转的性质 使偏振光振动平面旋转，如乳酸、葡萄糖溶液等。 旋光度： α 旋光物质使偏振光振动平面旋转的角度。 左旋体 右旋体 * Bronsted-Lowry酸碱质子理论，氨基酸的偶极离子既是质子共体也是质子受体 * 0.1mol Gly水溶液,pH=6; 横坐标HCl/NaOH摩尔数 * 烃基化反应,Sanger蛋白质N端分析 * 烃基化反应,PTC-苯氨基硫甲酰: PTC-苯氨基硫甲酰 * 酰化反应 * 蛋白质人工 * 20AA→20肽, 2x1018 * 下丘脑分泌作用于垂体 肽抗生素是生物界中广泛存在的一类具有一定生物活性的肽，一般具有抗细菌或真菌的作用，有些还具有抗原虫、病毒或癌细胞的功能。属于此类的抗生素有粘菌素、多粘菌素B、杆菌肽、维吉尼亚霉素、持久霉素、硫肽霉素、蜜柑霉素及阿伏霉素等。多数肽抗生素对革兰氏阳性菌有较强的杀菌作用，个别则对革兰氏阴性菌和绿脓杆菌有作用。其作用机制包括干扰细菌细胞膜或蛋白质合成功能。其结构复杂，作用机制缺乏特异性，故细菌难以产生耐药性，且与其他类抗生素不易产生交叉耐药性。在正常使用量下不必考虑在畜禽产品中的残留问题，这一优点扩大了它们的使用范围，是一类非常理想的饲料添加剂。 * AA 2.97 5.68 9.74 第三节 蛋白质的结构 自然界存在的蛋白质1010-1012 组成蛋白质的氨基酸——20种 20世纪50年代初，Linder stron-Long：蛋白质具有不同结构层次 一级结构(primary structure) 二级结构(secondary structure) 三级结构(tertiary structure) 四级结构(quaternary structure) 高级 结构 蛋白质的分子结构包括: 一、 蛋白质的一级结构(primary structure) 定义 蛋白质的一级结构指多肽链中氨基酸的排列顺序和连接方式。 主要的化学键 肽键，有些蛋白质还包括二硫键。 (Peptide bond, Disulfide bond) 1. 肽键和肽链 肽键(pe