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可溶性糖类的提取和澄清
主讲:俞彦波
食品营养与检测专业教学资源库
可溶性糖类的提取和澄清
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(1) 提取液的制备
常用的提取剂有水和乙醇溶液:a、水:提取温度控制在45~50℃之间 蛋白质、氨基酸、色素等杂质溶出,干 扰测定结果。b、乙醇:浓度控制在70~75%之间 适合含酶多的样品,避免糖被水解。
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提取液的制备方法要根据样品的性状而定,但应遵循以下原则:
①取样量和稀释倍数的确定,要考虑所采用的分析方法的检测范围。 一般提取经净化和可能的转化后,每毫升含糖量应在0.5~3.5mg之间,提取10克含糖2%的样品可在100毫升容量瓶中进行;而对于含糖较高的食品,可取5~10克样品于250毫升容量瓶中进行提取。
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②含脂肪的食品,如乳酪, 巧克力,蛋黄酱及蛋白杏仁糖等,通常需经脱脂后再以水进行提取。
一般以石油醚处理一次或几次,必要时可以加热。每次处理后,倾去石油醚层(如分层不好,可以进行离心分离),然后用水提取。
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③ 含大量淀粉和糊精的食品,如粮谷制品,某些蔬菜,调味品,用水提取会使部分淀粉,糊精溶出,影响测定,同时过滤也困难,为此,宜采用乙醇溶液提取。 乙醇溶液的浓度应高到足以使淀粉和糊精沉淀,通常用70~75%的乙醇溶液。 若样品含水量较高,混合后的最终浓度应控制在上述范围内。 提取时可加热回流,然后冷却并离心,倾出上清液,如此提取2~3次,合并提取液,蒸发除去乙醇。 用乙醇溶液作提取剂时,提取液不用除蛋白质,因为蛋白质不会溶解出来。
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④ 含酒精和二氧化碳的液体样品,通常蒸发至原体积1/3~1/4,以除去酒精和二氧化碳。但酸性食品,在加热前应预先用氢氧化钠调节样品溶液至中性,以防止低聚糖被部分水解。
⑤提取固体样品时,为提高提取效果,有时需加热,加热温度一般控制在40~50℃,一般不超过80℃,温度过高时右溶性多糖溶出,增加下步澄清工作的负担,用乙醇做提取剂,加热时应安装回流装置。
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(2)提取液的澄清
①能较完全地除去干扰物质;
②不吸附或沉淀被测糖分,也不改变被测糖分的理化性质;
③过剩的澄清剂应不干扰后面的分析操作,易于除掉。
常用三种澄清剂:
中性醋酸铅[Pb(CHCOO)2•3H2O]
乙酸锌和亚铁氰化钾溶液
作为澄清剂必需具备以下几点要求:
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用量必须适当,太少,达不到澄清的目的,太多,会使分析结果产生误差。
一般先向样液中加入1~3 ml 澄清剂,充分混合后静置。
(3)澄清剂的用量
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