生物产品分析与检验技术有机酸概述及柠檬酸测定柠檬酸分析与检验1.pptx

《生物产品的分析与检验》;柠檬酸(citric acid)，又名枸橼酸，学名为2-羟丙烷三羧酸。 易溶于水、乙醇和乙醚，无毒，有强酸味。 通常有两种存在形式：一水柠檬酸（C6H8O7 ·H2O ，相对分子质量为210.14）和无水柠檬酸（C6H8O7，相对分子质量为192.13）。;柠檬酸是有机酸中的第一大酸，广泛应用于食品、医药、日化等行业。 在食品行业中用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、点心、饼干、罐头果汁、乳制品等食品的酸味调节剂。 在医药行业中具有止渴生津、祛痰、祛暑、安胎、疏滞、健胃、止痛等功能，可以有效防止和消除皮肤色素沉着的作用。;柠檬酸含量的测定方法主要有 酸碱滴定法 褪色光度法;酸碱滴定法测定柠檬酸含量;用酚酞做指示剂，用氢氧化钠标准溶液同时直接滴定第一步、第二步和第三步离解产生的H+，根据终点时消耗氢氧化钠标准溶液的体积，可以求出柠檬酸的含量。;主要仪器设备 三角瓶150mL、碱式滴定管 试剂 浓度为1mol/L氢氧化钠标准溶液 浓度为1%（10g/L）酚酞指示剂;（三） 操作步骤;1. 计算公式 w1— 一水柠檬酸含量(按无水计)，%； w2— 无水柠檬酸含量，%； V1— 滴定试样所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL； V0— 空白滴定所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL； C— 氢氧化钠标准溶液的浓度，mol／L； m 1— 试样质量，g； 0.06404 — 与1.00mL氢氧化钠标准滴定溶液[CNaOH=1.000mol/L]相当的以克表示的柠檬酸的质量； 0.08566── 一水柠檬酸（C6H8H2O）中的H2O的理论含量。;2. 结果记录;样品质量精确至万分之一 样品溶液要充分溶解 滴定过程中要注意颜色的变化 通过空白滴定消除试剂误差;褪色光度法测定柠檬酸含量;;; 10g/L的柠檬酸标准储备液 1g/L的柠檬酸标准储备液 0.01mol/L的铁（III）溶液 0.01mol/L的磺基水杨酸溶液 HAc-NH4Ac缓冲溶液 0.025mol/L的HCIO4溶液;1. 磺基水杨酸铁配合物吸光度的测定 往25mL比色管中依次加入1.0mL铁（III）溶液，4.0mL磺基水杨酸溶液，4.0mL HAc-NH4Ac缓冲溶液，加水定容至刻度。10min时，在470nm处用1.0cm比色皿以蒸馏水作参比测得吸光度A0.;2. 标准曲线的绘制 另取6支25mL比色管，同（1）操作，仅在定容前分别加入0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL柠檬酸标准工作溶液，各管溶液中柠檬酸的含量分别为0.0mg、0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、1.0mg，分别测得吸光度A，计算△A=A0-A，以柠檬酸的含量mg/(25mL)为横坐标，△A为纵坐标绘制标准曲线。;3. 样品的测定 精确称取0.1g样品，用水溶液并定容至100mL，另取1支25mL比色管，同（1）操作，仅在定容前加入0.5mL样品溶液，测得吸光度Ax， 计算：△Ax=A0-Ax 。;溶液中柠檬酸的含量/[mg/(25mL)];2. 柠檬酸含量测定记录表;3. 计算公式 式中：w---样品中柠檬酸的含量，% m1--从标准曲线上查得25mL样品溶液中柠檬酸的含量，mg； m--待测样品质量，mg； 10-3---将mg换算为g的系数； 100---配制的样品溶液体积，mL; 0.5---测得用样品溶液体积，mL.