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“ ” “ ” 项目五 火腿肠中亚硝酸盐含量的测定 实验目的 熟悉可见分光光度计的使用方法。 掌握火腿肠中的亚硝酸盐的含量测定的原理和方法。 熟悉吸收曲线绘制的方法。 实验原理 实验试剂与仪器 01 样品处理 称取3g捣碎且搅拌均匀的火腿肠于50ml烧杯中,加入饱和硼砂溶液7.5ml,以玻璃搅匀,以70℃左右的蒸馏水约100ml将其全部洗入250ml的容量瓶中,置于沸水浴中加热15 min,取出冷却至室温,一边振荡一边加入5ml亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5ml乙酸锌溶液以沉淀蛋白质。加入蒸馏水定容至刻度,摇匀,静置30min。除去上层皮脂肪,清夜用滤纸过滤,弃去初滤液30ml,收集滤液备用。 步 骤 02 亚硝酸钠标准溶液的配制 取10.00ml亚硝酸钠标准储备液,置于100ml容量瓶中,加水稀释至刻度。得到0.005mg/ml亚硝酸钠标准溶液 步 骤 03 系列标准溶液配制 步 骤 试管编号 1 2 3 4 5 6 7 亚硝酸钠标准使用液 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 0.4%对氨基苯磺酸 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 0.2%盐酸萘乙二胺溶液 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 吸光度 04 工作曲线的绘制 以1号溶液做空白调零,在最大波长下分别测定2~7号标准系列溶液的吸光度 步 骤 06 样品测定 在50ml比色管中加入样品溶液至25ml刻度,分别加入1.00ml对氨基苯磺酸,密塞混匀,静置5分钟;分别加入1.00ml醋酸钠和盐酸-萘乙二胺,加蒸馏水稀释至50ml刻度,静置10分钟。同等条件下测定样品溶液的吸光度。 步 骤 实验数据记录与处理 标2 标3 标4 标5 标6 标7 样1 样2 样3 吸光度 浓度 —— —— —— 结果计算 式中: X----样品中亚硝酸盐的含量,mg/kg; m----样品质量,g; A ---测定用样液中亚硝酸盐的含量,ug. V1----样品处理液总体积,mL; V2----测定用样液体积,mL。 * * * * * * * * * “ ” “ ” * * * * * * * * *
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