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核酸的生物合成;教学大纲;单击画面继续;第一节 DNA的生物合成;一、DNA的复制方式;DNA半保留复制的证据;几个相关概念:
1. 复制起始点 (origin, ori)
原核生物只有一个复制起始点;
真核生物染色体DNA有多个复制起始
点,同时形成多个复制单位, 两个起始点
之间的DNA片段称为复制子(replicon)。; ;
2. 复制叉 (replication fork)
复制时双链打开,分开成两股,新链沿
着张开的模板生成,复制中形成的这种Y
字形的结构称为复制叉。;二、 原核生物DNA复制的参与因子;(一)DNA聚合酶的活性; 5′至3′的聚合活性( 5′→ 3′ )
;;大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶的结构和功能;(二)DNA拓扑异构酶(解旋酶)
既能水解,又能打断碱基互补配对的氢键
拓扑酶Ⅰ 切断DNA双链中的一股
拓扑酶Ⅱ 切断DNA双链
(三)解链酶
使复制差前方的双链截开一小段
(四)单链DNA结合蛋白(SSB)
维持模板处于单链状态
保护单链的完整
(五)引物酶
是RNA聚合酶,合成一段RNA引物
;(六) DNA连接酶(ligase);三、DNA的复制过程; 1. DNA复制的起点 原核生物从一个固定的起始点开始,同时向两个方向进行的,称为双向复制; 2.复制叉的形成
复制叉----复制开始后由于DNA双链解开,在两股单链上进行复制,形成在显微镜下可看到的叉状结构。
;3.起始的过程;;;;;;二、DNA复制的延伸;;;;;;;;;;单击画面继续;3.半不连续复制;三 复制的终止;大肠杆菌三种DNA聚合酶比较;DNA忠实性的保障;复制的忠实性;DNA聚合酶的校对功能;DNA聚合酶的校对功能;起始时以RNA作为引物的作用;;三、真核DNA的复制合成;DNA复制过程;真核生物DNA复制叉结构示意图;端粒酶(telomerase);端粒合成的一种模型;真核和原核DNA细胞复制比较;四、逆转录
1、逆转录:是以RNA为模板合成
DNA的过程。
2、逆转录酶:是一种以RNA为模
板的DNA聚合酶。
没有3’ 5’外切酶的活性,
所以没有校对功能,逆转录的
错配率高。;五、 DNA的损伤修复;二、引发突变的因素 ; 三、突变分子改变的类型
错配 (点突变)
一个碱基改变
缺失、插入和框移突变
片段插入或缺失
重???
较大片段重组或重排
; 四、 损伤的修复; (一)光修复
紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体
光修复酶可使二聚体解聚为单体状态,DNA完全恢
复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。;;;;第二节 RNA的生物合成;转录特点:;(二)转录过程
1.起始;;2.延长
σ因子循环 ;
;依赖r -因子的终止子的终止反应:;
转录过程:;;;;;;;;;;;;;;;DNA和RNA合成的比较;第三节 RNA转录后的加工;转录后加工:
指在细胞内,由RNA聚合酶合成的初始转录产物需要经过一系列的变化才能转变为成熟的RNA分子的过程。;(一)、rRNA前体的加工;(二) tRNA的加工;三、真核生物RNA的一般加工;真核mRNA前体的加工步骤:;;多聚腺苷酸聚合酶;因发现断裂基因而获1993年诺贝尔生理学奖的Richard J Robert and Phllip A Sharp;(二)真核rRNA前体的加工;(三)真核tRNA前体的加工;四、RNA的拼接机理; 核酶的发现:;The M1 RNA
in ribonuclease
P is catalytic;第四节 基因工程及分子生物学 技术简介;一、基因工程简介;基因工程的操作技术; 大白鼠的生长激素基因插入到一个质粒中去,在金属巯基蛋白启动子旁边,这个启动子被金属镉所活化; 三、PCR技术原理示意图;基因工程的应用和前景;克隆羊多利的诞生;;作业;教学大纲;(二)DNA拓扑异构酶(解旋酶)
既能水解,又能打断碱基互补配对的氢键
拓扑酶Ⅰ 切断DNA双链中的一股
拓扑酶Ⅱ 切断DNA双链
(三)解链酶
使复制差前方的双链截开一小段
(四)单链DNA结合蛋白(SSB)
维持模板处于单链状态
保护单链的完整
(五)引物酶
是RNA聚合酶,合成一段RNA引物
;三、DNA的复制过程;;;单击画面继续;
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