蛹虫草培养条件.doc

蛹虫草培养条件的优化 蛹虫草为子囊菌亚门,麦角菌目，麦角菌科、虫草属的模式种。学名为 Cordycepsmilitaris ,又名北冬虫夏草、北蛹虫草、虫草等。世界性分布天然资源数 量很少。由子座（即草部分）与菌核（即虫的尸体部分）两部分组成的复合体。冬季 幼虫蛰居土里,菌类寄生其中，吸取营养，幼虫体内充满菌丝而死。到了夏季，自幼 虫尸体之上生出幼苗，形似草，夏至前后采集而得⑴。蛹虫草不仅具有特殊的营养价 值，而且有明显的药用价值。近年来,由于天然冬虫夏草日趋枯竭…为了满足消费 需求，保护有限的虫草资源，，人们开始采用大米、碎玉米、小麦、蚕蛹等，栽 培与天然冬虫草有相似功效，并可人工规模化培育的北冬睡草（蛹虫草）子 实体，代替价格日益高涨的天然冬虫夏草［2］。 1.1主要实验材料 大米，蚕蛹，鸡蛋，磷酸二氢钾,硫酸镁, 1.2主要实验设备 接种箱”恒温培养箱”注射器, 2.1蛹虫草子实体人工培养工艺 培养基制备一灭菌-接种-恒温培养-子实体采收 2.2工艺要点 2.2.1培养基组成 大米3000g磷酸二氢钾4. 5g 鸡蛋清8个硫酸镁3. 6g 蚕蛹100g水3000-4500ml （根据米的持水量而定） pH 7. 0-8. 0 注：该配方为100个培养瓶的用量。［3］ 2.2.2培养基的制备 将蚕蛹加2500mL水煮沸30min ,然后过滤,取滤液补水至2500mL ,待用；在鸡蛋清中 加500-1000mL水，顺一方向充分搅拌均匀；将磷酸二氢钾、硫酸镁分别用少量的水溶 解；把大米分装100个瓶中，每瓶约30go 将以上的四种液体充分混合，均匀地分装到大米在中，然后用聚丙烯塑料薄膜将口包 好。将做好的栽培瓶平放于灭菌锅中，0.1MPd、121°C条件下灭菌45mino放入接种箱 冷却,灭菌。 2.2.3接种、培养 在接种箱无菌条件下进行接种。接种后移至恒温培养箱中避光、25°C条件下培养约一 个月。转色后，通散射光、18-22°C.湿度保持在5-90%条件下培养至采收。 在接种箱无菌条件下进行接种，培养空气相对湿度85%-90%, 20-25°C下菌丝暗培养时间 按照正交试验设计,分别培养2、3、4de菌丝培养完毕后,进行光照培养，诱导子实 体原基产生/ lOOOOlux每天光照9. 5 — 10h。子实体原基有少量出现时，用0. 2mm粗 的针扎孔进行通气，每瓶扎5个孔。培养45d后,子实体顶端膨大,出现黄色粉末即 子实体成熟的标志，即可进行收采。 2.2.4采收 当虫草子座表面形成颗粒壮的子囊壳时采收，采收后用低温烘干，灭封保存。 2.3.1蛹虫草子实体的人工培育工艺流程[4] 储茧一洗涤一制菌-培养一割茧一消毒一接种-育蛹-育草一采 收-干制 3结果与讨论 3.1母中传代数对子实体产量的影响 表— 母钟传代数 蛹虫草子实体产量g/瓶 1 16. 7 2 15.3 3 10.2 由上表不难看出，子实体的产量随着母种代数的增加而下降。在转接五代以上时就很 难再长出蛹虫草子实体了。考虑到成本和实际生产的效率z母钟转接第二代时进行蛹 虫草子实体培养z更符合实际的生产。 3.2液体菌种培养天数对子实体产量的影响 表二 液体菌种培养天数 蛹虫草子实体产量g/瓶 5 13.4 7 15. 7 9 14. 1 14 9.2 表中数据可以得出结论,液体菌种培养时间在7天左右时进行接种，产量最高。而且 培养时间越长，其产量下降越明显。通过培养观察还发下，培养时间在8天以上的液 体菌种其染菌率明显上升,且培养出的子实体大量出现畸形。对产量影响非常大。因此 可以得出，液体菌种培养时间在6-7天时进行接种最为合适，其染菌率和产量均非常 理想。 3.3料水比对子实体质量的影响[5] 料水比M/V蛹虫草子实体质量g/瓶 表三 料水比M/V瓶 蛹虫草子实体质量g/瓶 0.5:1 7.9 1:1 15.3 1:1.5 13.6 1:2 14. 1 由上表可知当料水比为1:1时，蛹虫草生长状况最好。 3.4接种量与子实体质量的关系 接种量ml/瓶蛹虫草子实体质量g/瓶 接种量ml/瓶 蛹虫草子实体质量g/瓶 20 11.6 30 15.4 40 15.8 表 !1 通过分析可知,子实体的质量随接种量的增加而增加,当接种量达一定程度时,其增 速减缓直至停滞。 3.5培养温度对子实体产量和培养时间的影响 培养温度°C蛹虫草子实体质量瓶 表五 培养温度。C 蛹虫草子实体质量瓶 培养时间/天 10 8.6 75 20 13.9 49 30 11.7 39 综合以上数据可知当培养温度为20弋时，其生长状况最好。在培养过程中还发现，当 温度低于15弋时，菌丝很容易贴壁生长,并且导致蛹虫草生长畸形，染菌率明显上升。 而温度在18°C~24°C之间时，蛹虫草产量基本