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鲫麻醉与采血
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鱼类血液是重要的组织
◼ 血液生理生化指标可以反
映出鱼类的生理状态
◼ 常用于水产科学研究
鱼类血液采集方法
可以通过断尾、心脏、动脉或静脉血管进行鱼类血液的
采集
为了最大限度地保证实验鱼类的存活和血液样品的
质量 ,我们一般会采用直接血管采血法 ,从尾动脉
或尾静脉利用注射器进行采血 ,通过采血器负压将
血管内的血液抽取到采血管中。
鱼类血液采集步骤
• 实验前准备
• 采血过程
• 血浆与血清制备
• 试剂与器械介绍
(麻醉剂、注射器、采血管)
• 鱼类的麻醉
➢在采血前 ,我们将麻醉剂放
入水中溶解 ,麻醉剂的浓度
在100mg/L左右。
➢若研究需要 ,不能对鱼类进
行麻醉 ,应该采用有效的方
法禁止鱼类在采血时的活动 ,
以免影响采血效果。
经血管采血
➢将麻醉好的鱼取出 ,擦干体
表液体 ,把鱼侧放在垫布上。
➢剔除臀鳍上方的侧线处的鳞
片 ,紧贴侧线下将针头插入
肌肉内 ,将针刺入抵达脊椎
下动脉中 ,轻拉注射器活塞 ,
造成针管内负压。
➢调整位置采集血液。一旦有血
液进入采血管中 ,维持采血姿
势不变 ,以免因抖动而使针头
游移出血管 ,导致采集不到血
液。
➢待采集到合适血量后 ,拔出针
头。将采集到的血液分别注入
到抗凝管与非抗凝管中 ,混匀
后放置在试管架上 ,室温放置
1小时后离心。
断尾采血
➢ 鲫鱼麻醉后 ,擦干体表水分和粘液 ,
将臀鳍后缘垂直于侧线方向的一圈
鳞片剔出。
➢ 鱼头朝上 ,露出尾柄 ,用手拉住尾
鳍 ,然后用粗剪刀从鳞片剔出处将
尾柄剪断 ,这时从体轴中心处即可
流出血液。
➢ 用涂有肝素的表面皿盛接。在接血
的同时 ,缓慢晃动表面皿 ,使血液
与肝素充分混匀 ,防止凝血。
➢采血时要注意防止体表残留水分、粘液或者鳞片等混入
所采集的血液中以免污染血液样品;在剪断尾鳍后 ,血
液涌出较迅速 ,要及时收集 ,以免拖延时间造成采血量
不足;
➢若流血不畅 ,则可轻轻按摸躯体加速血液流动 ,仍可取
到数滴血。或者 ,也可以利用毛细采血管直接从出血点
采集血液。
◼ 血浆的制备
◼ 将抗凝采血管放入离心机中,
以3500转/分钟的转度离心10
分钟。离心完毕后,轻轻取出
采血管。
◼ 澄清透明的上清液即为血浆。
◼ 将血浆转入PE管中,保存备用。
◼ 血清的制备
◼ 将静置分层的非抗凝管放入离心
机中,以1000转/分钟的转速离
心30min。
◼ 离心完毕后,轻轻取出采血管。
◼ 澄清透明的上清液即为血清。
◼ 将血清转入PE管中,保存备用。
鲫麻醉与采血
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