植物有丝分裂实验报告.doc

植物有丝分裂实验报告 主研人：邓正强 组员：曹敏、宋卓霖、代芝芝、吴茵茵 实验目的 观察植物细胞有丝分裂的过程，能够识别有丝分裂的不同时期。 是比较以植物根尖、茎尖、幼芽做有丝分裂的材料的难易程度。 初步掌握制作植物（根尖、茎尖、幼芽）有丝分裂装片的技术。 二、实验原理 有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式，细胞分裂过程中，核内染色体准确地复制，并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去，使子细胞和母细胞的遗传组成一样，保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中，如根尖组织、茎尖组织、居间分生组织、愈伤组织等，常进行着剧烈的细胞有丝分裂。在细胞分裂的适当（分裂旺盛期）时候取材，进行预处理，固定、解离、染色和涂抹压片等方法，使细胞、染色体分散，便于在显微镜下观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色体计数。 实验材料、实验器材及试剂 实验材料：蚕豆干种子、 实验器材：显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、镊子、刀片、滴管、吸水纸等 实验试剂：卡诺固定液（无水乙醇:冰醋酸=1:1）、1mol／L HCl溶液、0.01g/ml龙胆紫染液或0.02g/ml醋酸洋红染液或改良石炭酸品红染液。 实验步骤 （一）、材料准备 1.　蚕豆根尖：选取新鲜无病斑的蚕豆干种子，经日晒后，放在烧杯内，室温下清水浸泡一昼夜。种子吸水膨胀后，放在培养皿上20℃左右保湿培养（双层纱布覆盖），待根长1~2cm 2. 蚕豆茎尖：选取新鲜无病斑的蚕豆干种子，经日晒后，放在烧杯内，室温下清水浸泡一昼夜。种子吸水膨胀后，放在培养皿上20℃ 3. 蚕豆幼芽：在长出的蚕豆茎两片叶原基上1cm处截断，待在叶原基部发出幼芽，叶芽长出到4~5cm时即可，于上午9:00~10:30或下午14:00~16:00进剪下幼芽备用。 （二）、预处理 将截取的蚕豆根尖、茎尖、幼放入盛有蒸馏水的小烧杯，置于冰水溶液中,0~3℃下处理24小时。 （三）、解离 根尖、茎尖等体细胞需经处理，除去细胞间的果胶层，并使细胞壁软化，才便于压片。这种处理过程称为解离，解离时间的长短依植物材料和解离液的不同而不同。时间短细胞不易压散，时间过长，细胞被压破，且影响染色效果。 固定好的蚕豆根尖、茎尖芽用蒸馏水冲洗2遍，然后放入预热的60℃的1mol/ml盐酸中，60 注：：1N HCl由36%~38%浓盐酸取83ml定容至1升配置而成 （四）、漂洗 将解离好的材料用清水漂洗10min。洗去组织中的解离液，有利于染色。 （五）、染色 将漂洗好的材料取出放在载玻片上滴加改良品红溶液，静置染色10~15min，或（0.01g/ml龙胆紫、0.02g/ml醋酸洋红溶液染色3~5min）。 （六）、制片 用吸水纸吸去根尖周围多余染液，加1滴清水，吸干，再加1滴清水，盖上盖玻片，在盖玻片上再加1片载玻片，用力压片。 （七）、观察 将制成的装片先在低倍镜下找到生长点区域，该区域的特征是：细胞略呈正方形，且紧密排成束状，细胞核与核间距≤核直径；核间距≥2倍核直径的区域，分裂相细胞少。找到生长点区域后，再换成高倍镜进行分裂相各期细胞的观察。 实验现象 蚕豆的根尖、腋芽、茎尖都有大量的细胞处于有丝分裂中。但是腋芽中处于有丝分裂的细胞比茎尖和根尖的细胞要多，而且可以看到有很多处于有丝分裂的末期。但是很遗憾的是没有看到有丝分裂的后期的细胞。 实验现象分析 实验中大量的细胞处于有丝分裂的末期，而没有观看到有丝分裂后期的细胞，从而不能够清楚的数清蚕豆染色体的具体数目是多少，在一定的程度上表明实验的失败。实验失败的原因经过分析后我们一致认为是在进行解离之前没有进行材料的固定，从而不能杀死正在处于有丝分裂中的细胞，在细胞原有的能量的基础之上为细胞的进一步分裂提供了能量，但因为能量有限从而导致细胞中后期的细胞不明显，而末期的细胞比较明显。其次蚕豆材料是通过制作芽苗菜的形式制作的，由于实验的延期胚乳的有机物已经大量的被利用之后茎和芽通过光合作用还可以生长，但由于可能偶尔没有浇水，再加上缺乏无机盐导致根尖分生区不明显或者没有分生区，这样就使得腋芽比根和茎更适合作为有丝分裂的材料。 实验结果 经过实验表明蚕豆如果用于观察有丝分裂的材料，那么选择腋芽比茎尖和根尖分生区要好。 实验注意事项 注意刀片、镊子和显微镜的正确使用方法。 实验的第七步，敲片一定要用力均匀，不能太用力敲，否则会敲坏盖玻片，也不能用力太小，否则细胞不能分散开，要垂直受力。 、 3、材料一定要固定杀死细胞，然后解离去除细胞壁。