高等结构分析：激光共聚焦显微镜（LSCM）.pdf

2010-6-28 激光共聚焦显微镜VS传统光学显微镜 激光共聚焦显微镜（LSCM） 激光共聚焦显微镜 传统光学显微镜 点光源 场光源 点成像 面成像 电子衍射 不受邻近点的衍射光 每一点图像受邻近点 或散射光的干扰 的衍射光或散射光的 干扰 S/N高 S/N低 极限分辨率0.2μm 极限分辨率0.2μm LSCM工作原理示意图 激光共聚焦显微镜的发展 1957年，Marvin Minsky提出共聚焦显微镜技术的基本原 理，并获得美国专利。 共焦共焦：：照明针孔照明针孔与与探测针孔探测针孔相相 1967年，Egger和Petran成功应用共聚焦显微镜产生了一 对于物镜焦平面是共轭的，焦 个光学横断切面。 平面上的点同时聚焦于照明针 1977年，Sheppard和Wilson首次描述了光与被照明物体原 孔和探测针孔，焦平面以外的 子之间的非线性关系和激光扫描器的拉曼光谱学。 点不会在探测针孔处成像。 1987年，White和Amos在Nature发表了“共聚焦显微镜时 代的到来” 一文，标志着LSCM已成为进行科学研究的重要 工具。 焦平面 LSCM系统结构示意图 激光光源特点： 单色性好、平行性好、亮度高、强度大、相干性和偏振性好 常用激光器谱线： Ar激光器_458 nm, 476 nm, 488 nm, 514 nm; Kr激光器_568 nm, 647 nm; HeNe激光器_543 nm, 633 nm; Ar(UV)激光器_351 nm, 364 nm; 蓝紫光半导体激光器_405 nm