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兽医传染病学:附红细胞体病.pptVIP

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病兔 全身皮肤黄染,血液稀薄,凝固不良;心肌变薄,颜色变淡; 胸腔有淡红色渗出液,肺表面有小出血点。尤以尖叶为重,肺脏表面呈深褐色;胆囊大,胆内充满胆汁;胃内容物无异常变化,胃粘膜脱落;脾脏肿大、质地变软,被膜上常有大小不等的暗红色或鲜红色出血点;肾脏肿大变性,表面有出血斑点;切面可见有皮质部和髓质部分界模糊,肾盂积水;膀胱黏膜黄染并有出血点。 七、Diagnosis 1、查找病原 在急性发热期间作显微镜检查效果最好。 (1)鲜血压片镜检 采耳静脉末梢血,将血样在水浴锅内加热至38℃, 或血液1滴与1滴生理盐水混合,制成血液抹片(再压盖玻片/经姬姆萨染色),油镜下观察,若在红细胞表面见到卵圆形或圆形的、或完全将红细胞包围的链状附红细胞体。 判定:在1000×显微镜下观察20个视野,发现附红体者为阳性。 血浆中有无多量卵圆形、逗点状、短杆状及月牙形,折光性强的虫体,虫体不停地翻转、摇摆或做不规则运动; 附着于红细胞表面的附红体呈单个或成团寄生,呈菠萝状、锯齿状、星状等不规则变形。 (2)血涂片镜检: 对附红细胞体的染色方法主要有瑞氏染色(Wright Stain)法、姬姆萨染色(Giemsa Stain)法及吖啶橙(Acridine Orange)染色法。后者需要荧光显微镜及暗室环境才可观察,这三种方法的特异性和敏感性都不是很高。 误诊很严重,一些所谓确实就是的病例,查不出附红细胞体。 多种病、健动物血检压片均为阳性。发现有,也不一定就发生疾病。 七、Diagnosis 采集血样时,宜用柠檬酸盐作抗凝剂,不宜用EDTA或肝素(分别对感染性或PCR有干扰) 猪红细胞压积从39.6%降到24%,Hb从10~15g/100ml降到3~7g/100ml; 2、动物试验 用可疑动物血液接种健康试验动物(小鼠、兔、鸡等)或鸡胚,接种后观察其表现并采血查附红体。此法费时较长,但有一定辅助诊断意义。 切除疑为感染的猪脾脏或将疑为感染猪的血液输给切除脾脏的猪。如若人工感染猪呈急性发病,此时可通过查找血涂片中的虫体进行诊断。 3、血清学检查 (1)补体结合试验:1958年Spliter率先用该方法诊断猪附红细胞体病。病猪出现症状后的1~7d呈阳性反应,但2~3周后即可转为阴性。但该法难以诊断慢性附红细胞体携带者。 (2)间接血凝试验:滴度大于1:40定为阳性,并证实该方法有很好的特异性,可检测隐性感染。用异种动物的红细胞并经醛化、鞣酸化后致敏,进行IHA试验,效果较好。该法简便、快速、准确敏感,能检出阳性耐过猪和隐性带附红细胞体的猪(张守发等,2004)。 (3)荧光抗体试验:荧光抗体试验最早用于诊断牛附红细胞体病,抗体在第4d出现,随感染率上升,28d达到高峰。该法也可用于猪、羊附红细胞体病诊断,效果较好。 ? (4)酶联免疫吸附试验(ELISA): 1986年Lang等用去掉红细胞的绵羊附红细胞体抗原对羊进行ELISA,认为此法比间接血凝试验的敏感性高8倍。有人用此法检查猪,认为比补体结合试验敏感,而且猪附红体抗原与猪其他疾病感染的血清无交叉反应,但不适应小猪和公猪的诊断,也不适于急性诊断。 5、分子诊断: Oberst等取猪附红细胞体感染高峰期的血液分离附红体,提取DNA,以32P标记制成探针,可以区分猪附红体感染的猪和非感染猪,并且不与猪感染其他疾病血清中的DNA发生杂交反应。 1993年Gwaltney等报道了检测猪附红细胞体的PCR方法,感染24h就可以出现PCR阳性,特异性强、敏感性高、检测速度快、结果可靠。在此基础上还建立有半巢式PCR方法与巢式PCR等方法诊断方法,进一步提高了敏感性。 Hoelzle等利用保守的msg1基因建立了荧光定量PCR检测方法,敏感性较常规PCR方法显著提高,荧光定量PCR不仅快速、准确、特异性高,还有可实时监测、线性范围广、定量以及自动化程度高的优点。 八、治疗 原则上要早期用药,同时要进行辅助性对症治疗和做好消毒工作。 常用的药物有四环素、土霉素、卡那霉素、庆大霉素。金霉素、强力霉素、卡那霉素、庆大霉素等抗生素类药物和血虫净、贝尼儿、黄色素、阿散酸(arsanilic acid ),纳加诺尔(Napanol)等抗血液原虫类药物及中药治疗动物附红细胞体病,疗效较好。 马增军等进行的药敏试验表明血虫净和盐酸土霉素混合液对体外附红体最为敏感,用此两种药物组合用于治疗猪附红细胞体病的效果明显。 姜代勋等运用白头翁四君子汤治疗羊附红细胞体病,疗效显著。实际治疗过程中,除了使用上述药物外,还应配合强心、补液、健胃、导泻等对症辅助性综合治疗。 举例: 1、可用灭菌注射用水或生理盐水或5%葡萄糖注射液将血虫净配成3~5%的浓度,

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