樟芝菌丝体活化巨噬细胞诱发人类肝癌细胞凋亡之分子机制探讨.ppt

樟芝與Macrophage培養對PLC/PRF/5細胞凋亡之影響 A B 樟芝加入Macrophage培養與合併抗癌藥物對HepG2細胞凋亡之影響 A B RT-PCR MΦ(2×106-24hr) Control 野生AC 10mg/ml 野生AC 100mg/ml 固態AC 10mg/ml 固態AC 100mg/ml 多醣AC 10mg/ml 多醣AC 100mg/ml TNF- α LPS 2mg/ml β -actin IL-1β A B MΦ(2×106-48hr) Control 野生AC 10mg/ml 野生AC 100mg/ml 固態AC 10mg/ml 固態AC 100mg/ml 多醣AC 10mg/ml 多醣AC 100mg/ml TNF- α LPS 2mg/ml β -actin IL-1β B A * 樟芝菌絲體活化巨噬細胞誘發人類肝癌細胞凋亡之分子機制探討 Induction of apoptosis in human hepatoma cells by mycelia of Antrodia camphorata via activation macrophage 大綱 前言 材料與方法 結果與討論 結論 前言 95年台灣地區10大癌症 癌 症 死 亡 原 因 順序 綜合榜 男 性 女 性 1 肺癌 肝癌 肺癌 2 肝癌 肺癌 肝癌 3 結腸直腸癌 結腸直腸癌 結腸直腸癌 4 乳癌 口腔癌 乳癌 5 胃癌 胃癌 胃癌 6 口腔癌 食道癌 子宮頸癌 7 攝護腺癌 攝護腺癌 胰臟癌 8 子宮頸癌 胰臟癌 非何杰金淋巴癌 9 食道癌 非何杰金氏淋巴癌 膽囊癌 10 胰臟癌 鼻咽癌 卵巢癌 出處：行政院衛生署 肝癌 由於大多數病人並無早期徵兆或症狀，故肝癌亦稱為無聲殺手；且肝臟位於肋骨後面，所以無法直接觸摸到細小的腫瘤硬塊，因此在腫瘤未變大時很少有疼痛感。 江詩雯, 植物多醣萃取物對肝癌與T淋巴癌細胞增殖之影響,臺北醫學大學保健營養學系碩士論文 菌絲體 子實體 樟芝 牛樟芝，俗稱牛樟菇、牛樟芝，學名為Antrodia camphorata。就目前所知，牛樟芝為一台灣特有菌種，生長於牛樟樹中空樹洞中，會造成樟樹產生褐腐病 。 坊間流傳，牛樟芝具有保肝、解毒能力。 張益軒,牛樟芝分子生物鑑定系統之研究,國立台灣大學農業化學研究所碩士論文 多醣體 多醣體是由單糖類多數結合而成，這些多醣體在構成醣的種類、化學結合方式或是分子大小與性質方面都有很大差異 β-1,3葡聚醣 李宛蓁,樟芝菌絲體培養與生理活性成分生成之研究,東海大學化學工程研究所碩士論文 主要是造成菇類苦味的原因，由三十個碳所結合而成六角或五角形之天然有機化合物總稱。 三萜類 免疫調控 研究發現，複雜的免疫調控，主要是由淋巴球、抗原呈獻細胞等許多種類的細胞交互作用而完成，尤其是所分泌出來的細胞激素更是扮演重要角色 免疫抗腫瘤方面，發現活化作用可刺激巨噬細胞與自然殺手細胞，分泌如腫瘤壞死因子(TNF)與干擾素(IFN)等細胞激素，進而達到抑制腫瘤的作用 研究動機 找出樟芝菌絲體（低多醣體萃取液）之抗腫瘤作用做深入的研究，測定它是否具有直接的抑瘤作用，抑或是與免疫增強相關聯，繼而從細胞與分子生物學層面釐清其抗腫瘤作用之機轉。 材料與方法 材料 野生樟芝 固態發酵樟芝菌絲體 雙態發酵樟芝菌絲體 液態樟芝多醣抽出物 細胞株 HepG2 PLC/PRF/5-GFP RAW 264.7 Human hepatoblastoma Human hepatoblastoma BALB/c macrophage 有p53 gene 無p53 gene 有p21/WAF-1 gene 無p21/WAF-1 gene 有Fas/APO-1 無Fas/APO-1 野生樟芝與樟芝菌絲體 （乙醇萃取液） 液態樟芝多醣抽出物 （水萃取液） 抗氧化能力測試 【DPPH清除自由基】 、【螯合亞鐵離子】、【TEAC】 成分分析測試 【GPC】 、【HPLC】 細胞株(HepG2,PLC/PRF/5,RAW264.7) 上述各種樟芝與Macrophage(RAW264.7)培養 人類肝癌細胞株(HepG2,PLC/PRF/5) 細胞毒性測試 【MTT assay】 細胞週期觀察＆細胞凋亡分析【 Flow cytometry analysis】 細胞毒性測試 【MTT assay】 RT-PCR assay 西方墨點法【 Western blotting】 樟芝乙醇萃取液與Macrophage(RAW264.7)培養＋抗癌藥物 人類肝癌細胞株(HepG2,PLC/PRF/5)