临床医学免疫实验大纲.docVIP

《医学免疫学A》实验教学大纲 课程编号： 课程类别：课堂实践教学 实验学时：20学时 学 分：1 适用专业：临床本科 一、实验教学目的和任务 《医学免疫学》实验是为了使学生牢固掌握免疫学的基本方法与实验技术；加深学生对免疫学基本理论的理解；同时通过实验，培养学生观察问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力；培养学生实事求是、严谨踏实的科学态度和良好作风，以及敢于创新的开拓精神；也为学生进一步深入学习其他医学相关学科奠定基础。 二、实验教学基本要求 1、每次实验前必须充分预习实验内容，明确实验目的、原理、方法以及操作中的注意事项，保持思路清晰。 2、在实验过程中，应持严肃认真的科学态度，并要注意合理地分配和利用时间。 3、认真及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需要记下每次观察的现象和结果，以便分析。 4、每次的实验结果，应以实是求实的科学态度填入实验报告，力求简明准确，并及时汇交教师批阅。如实验结果与理论不符，应分析原因，训练科学思维的能力。 三、实验教学内容 实验项目一 1、实验项目名称：补体溶血试验 2、实验内容提要： （1）取小试管3只，按表加入各物（容量单位为毫升） （2）将上述3试管放在37℃水浴箱内15—30分钟观察有无凝血现象。 （3）将上述不溶血的试管低速离心，然后用毛细吸管将上清液与沉淀物分开。 （4）将上清液分别放入另两管中，共四管。 （5）按表加入各物（容量单位为毫升） （6）将上述4试管放在37℃水浴箱内15—30分钟观察结果。 实验项目二 1、实验项目名称：白细胞吞噬试验 2、实验内容提要： 取无菌肝素抗凝血0.2ml，葡萄球菌培养液0.2ml加入1.8ml血液中，混匀。 （2）葡萄球菌培养液0.2ml加入（1）37℃ （3）取一滴全血菌液混合液，置载玻片上，推片，待干。 （4）滴加甲醇固定3分钟，水洗。 （5）再加瑞氏染液染色1--2分钟，水洗、印干。 （6）置显微镜下观察吞噬和未吞噬细菌的白细胞数。 实验项目三 1、实验项目名称：溶菌酶的溶菌试验 2、实验内容提要： （1）制备含溶壁微球菌的琼脂平板。 （2）打孔 凝固后，用打孔器打孔，孔间距1.5－2cm。 （3）加样 周围四孔分别加入5、25、100、500μg溶菌酶标准品。 （4）结果 观察各孔周围溶菌情况，测量溶菌环直径。 实验项目四 1、实验项目名称：凝集反应——妊娠乳胶试验 2、实验内容提要： （1）分别用毛细管吸取生理盐水和待检尿滴于玻璃板的左右两侧。 （2）在两侧内各加一滴抗HCG血清，轻轻摇晃约2min。 （3）在两侧内各加一滴HCG乳胶抗原试剂，摇匀，约5min观察结果。 实验项目五 1、实验项目名称：E玫瑰花结实验 2、实验内容提要： （1）取静脉血（加肝素200U/ml抗凝），用Hanks液稀释1倍，混匀。 （2）取2～3ml淋巴细胞分离液加入试管中。 （3）用毛细滴管吸取稀释血液，使稀释血液重叠于分层液上。 （4）离心20min，小心取出试管，管内分4层，自上而下依次为血浆、单个核细胞、颗粒白细胞、红细胞。 （5）用毛细吸管吸出富含淋巴细胞的灰白色层即单个核细胞层，移入另一试管中。 （6）加入5倍以上体积的Hanks液混匀，离心，弃上清液，洗涤2次。 （7）最后用营养液配制成1～2×106/ml细胞悬液。 （8）将淋巴细胞悬液 0.1 毫升和绵羊红细胞 0.1 毫升混匀，37 ℃ 水浴 10 min，低速离心。取出后弃去大部分上清，轻轻摇匀，加0.8% 戊二醛2滴固定数分钟后涂片，自然干燥后加1滴瑞氏染色 实验项目六 1、实验项目名称：淋巴细胞转化实验 2、实验内容提要： （1）淋巴细胞的分离和药物的刺激培养 （2）淋巴细胞的E玫瑰花结实验 （3）淋巴细胞的转化率的计算 （4）细胞的吞噬功能检测 （5）实验数据的收集，讨论及报告 四、实验项目与学时分配 实验项目与学时分配表 序号 实验项目名称 学时 实验类型 实验主要仪器设备 备注 1 补体溶血实验 4 验证性 水浴箱、离心机、绵羊红细胞 必做 2 白细胞吞噬实验 4 验证性 培养箱、离心机、显微镜 必做 3 溶菌酶的溶菌试验 2 验证性 培养箱、打孔器 必做 4 凝集反应 2 验证性 试剂盒 必做 5 E玫瑰花节实验 4 综合设计 绵羊红细胞、小鼠、离心机 必做 6 淋巴细胞转化实验 4 综合设计 CO2培养箱、血液、离心机 必做 五、实验考核办法与成绩评定 根据学生实验课考勤、实验考试及实验报告综合评定实验成绩，实验成绩占本课程总成绩的20％--30％。 六、实验教材（或参考书、指导书） 医学院病原生物学与免疫学教研室自编实验指导书。 执笔人： 李仲娟 审核人： 批准时