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《医学免疫学B》实验教学大纲
课程编号:课程类别:专业基础课
实验学时:6学时
学 分:0.5
适用专业:护理学本科
一、实验教学目的和任务
《医学免疫学》实验是为了使学生牢固掌握免疫学的基本方法与实验技术;加深学生对免疫学基本理论的理解;同时通过实验,培养学生观察问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力;培养学生实事求是、严谨踏实的科学态度和良好作风,以及敢于创新的开拓精神;也为学生进一步深入学习其他医学相关学科奠定基础。
二、实验教学基本要求
1、每次实验前必须充分预习实验内容,明确实验目的、原理、方法以及操作中的注意事项,保持思路清晰。
2、在实验过程中,应持严肃认真的科学态度,并要注意合理地分配和利用时间。
3、认真及时做好实验记录,对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验,则需要记下每次观察的现象和结果,以便分析。
4、每次的实验结果,应以实是求实的科学态度填入实验报告,力求简明准确,并及时汇交教师批阅。如实验结果与理论不符,应分析原因,训练科学思维的能力。
三、实验教学内容
实验项目一
1、实验项目名称:溶菌酶的溶菌试验
2、实验内容提要:
(1)制备含溶壁微球菌的琼脂平板。
(2)打孔 凝固后,用打孔器打孔,孔间距1.5-2cm。
(3)加样 周围四孔分别加入5、25、100、500μg溶菌酶标准品。
(4)结果 观察各孔周围溶菌情况,测量溶菌环直径。
实验项目二
1、实验项目名称:凝集反应——妊娠乳胶试验
2、实验内容提要:
(1)分别用毛细管吸取生理盐水和待检尿滴于玻璃板的左右两侧。
(2)在两侧内各加一滴抗HCG血清,轻轻摇晃约2min。
(3)在两侧内各加一滴HCG乳胶抗原试剂,摇匀,约5min观察结果。
实验项目三
1、实验项目名称:白细胞吞噬试验
2、实验内容提要:
取无菌肝素抗凝血0.2ml,葡萄球菌培养液0.2ml加入1.8ml血液中,混匀。
(2)葡萄球菌培养液0.2ml加入(1)37℃
(3)取一滴全血菌液混合液,置载玻片上,推片,待干。
(4)滴加甲醇固定3分钟,水洗。
(5)再加瑞氏染液染色1--2分钟,水洗、印干。
(6)置显微镜下观察吞噬和未吞噬细菌的白细胞数。
实验项目四
1、实验项目名称:E玫瑰花结实验
2、实验内容提要:
(1)取静脉血(加肝素200U/ml抗凝),用Hanks液稀释1倍,混匀。
(2)取2~3ml淋巴细胞分离液加入试管中。
(3)用毛细滴管吸取稀释血液,使稀释血液重叠于分层液上。
(4)离心20min,小心取出试管,管内分4层,自上而下依次为血浆、单个核细胞、颗粒白细胞、红细胞。
(5)用毛细吸管吸出富含淋巴细胞的灰白色层即单个核细胞层,移入另一试管中。
(6)加入5倍以上体积的Hanks液混匀,离心,弃上清液,洗涤2次。
(7)最后用营养液配制成1~2×106/ml细胞悬液。
(8)将淋巴细胞悬液 0.1 毫升和绵羊红细胞 0.1 毫升混匀,37 ℃ 水浴 10 min,低速离心。取出后弃去大部分上清,轻轻摇匀,加0.8% 戊二醛2滴固定数分钟后涂片,自然干燥后加1滴瑞氏染色
四、实验项目与学时分配
实验项目与学时分配表
序号
实验项目名称
学时
实验类型
实验主要仪器设备
备注
1
溶菌酶的溶菌试验
2
验证性
培养箱、打孔器
选做
2
凝集反应
2
验证性
移液器
必做
3
白细胞吞噬试验
2
综合性实验
水浴箱、打孔器
必做
4
E玫瑰花结实验
4
综合性实验
培养箱、移液器、淋巴细胞分离液等
选做
五、实验考核办法与成绩评定
根据学生实验课考勤、实验操作及实验报告综合评定实验成绩,实验成绩占本课程总成绩的30%--40%。
六、实验教材(或参考书、指导书)
医学院病原生物学与免疫学教研室自编实验指导书。
执笔人:李仲娟 审核人: 2015年7月
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