森林土壤中有效磷的测定.doc

类别 序号 方法名称 方法依据 土壤 森林土壤有效磷的测定 比色法 LY/T 1232-2015 第 PAGE 3页共 NUMPAGES 5页 森林土壤有效磷的测定 比色法 方法确认报告 1. 目的 通过比色法测定森林土壤中有效磷含量的检出限、精密度、准确度，判断本实验室此方法是否合格。 2. 适用范围及方法标准依据 方法依据：LY/T 1232-2015 本标准适用用于森林土壤中有效磷的测定。 3.方法原理 在酸性环境中，正磷酸根和钼酸铵反应生成磷钼杂多酸络合物「H3P(M0O10)」，在锑试剂的存在下，用抗坏血酸将其还原生成蓝色的络合物再进行比色。 4.仪器和试剂 所有试剂除注明外，均匀分析纯。分析用水符合GB/T 6682 中二级水的规格要求。试验中所需标准滴定溶液，制剂及制品，在没有注明其他要求时均按GB/T 601、GB/T 603的规定制备。 4.1仪器 4.1.1 天平（感量0.01g）。 4.1.2 天平（感量0.0001g）。 4.1.3 恒温往复振荡机（速率150r/min～180r/min）。 4.1.4 紫外/可见分光光度计。 4.2试剂 4.2.1 硫酸（H2SO4）：ρ=1.84 g/mL，优级纯。 4.2.2 盐酸（HCl）：ρ=1.84 g/mL，优级纯。 4.2.3氢氧化钠，NaOH 4.2.4 2 mol/L氢氧化钠溶液。 称取80.0g氢氧化钠（NaOH）溶于水中，并用水定容至L。 4.2.5 二硝基酚指示剂 称取0.20g2.4-二硝基酚或2.6-二硝基酚溶于100 mL水中。 4.2.6 0.5 mol/L硫酸溶液 吸取28.0mL浓硫酸，缓缓注入不中，并用水定容至1L。 4.2.7 钼锑贮存液 量取153.0mL硫酸缓缓倒入约400mL水中，搅拌，冷却。另称取10.0g钼酸铵「（NH4）6MO7O24﹒4H2O」，溶于约60℃的300mL水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中，再加入100.0mL 5g/L酒石酸锑钾（4.2.11）溶液，最后用水稀释至1L，摇匀，贮存于棕色试剂瓶中，于4℃可保存2个月 4.2.8 钼锑抗显色剂 称取1.50g抗坏血酸（C6H8O6,左旋，旋光度+21゜～+22゜）溶于100mL钼锑贮存液（4.2.12）中。此液需现配现用。 4.2.9 磷标准储备液 称取105℃烘干2h的磷酸二氢钾（KH2PO4,优级纯）0.4394g，用水溶解后，加5.0mL浓硫酸，用水定容到1L，此为磷标准储备液「ρ（P）=100mg/L」,在4℃下可保存6个月。 4.2.10 5mg/L磷标准溶液 吸取5.00mL磷标准储备液（4.2.14）于100mL容量瓶中，加水定容至刻度，即为磷标准溶液「ρ（P）=5mg/L」，此溶液需现配现用 4.2.11 盐酸-硫酸浸提剂 吸取4.0mL盐酸及0.7mL硫酸于有水的1L容量瓶中，用水定容至刻度，此溶液含0.05mol/L和0.025mol/L H2SO4。 5.样品 将采集的土壤样品(一般不少于500g )混匀后用四分法缩分至约100g。缩分后的土样经风干(自然风干或冷冻干燥)后，除去土样中石子和动植物残体等异物.用木棒(或玛瑙棒)研压，通过2 mm尼龙筛（除去2 mm以上的砂砾），混匀。用玛瑙研钵将通过2 mm尼龙筛的土样研磨至全部通过100目（孔径0.14 9mm）尼龙筛，混匀后备用。 6.分析步骤 6.1 试液的制备 准确称取过2mm筛孔的风干土样5.00g 于浸提瓶中，加25.0mL，双酸浸提剂，在20℃～25℃恒温条件下160r/min振荡5min，过滤，待测液供测有效磷用（如滤液顔色过深，影响比色时，则需加无磷活性碳进行脱色处理。 6.2 标准曲线 分别吸取5mg/L磷标准溶液（4.2.15）0.00 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL，于50 mL容量瓶中，再分别加入与待测液等量的盐酸-硫酸浸提剂，加1滴二硝基酚指示剂，用2mol/L氢氧化钠和0.5mol/L硫酸液溶调节pH值至溶液刚呈微黄色，准确加入5.0 mL钼锑抗显色剂用水定容到刻度，摇匀。在室温20℃条件下放置30min（如室温过低时，可放置在30℃～40℃的恒温箱中保持30min）显蓝色（在8h内保持稳定），获得0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.30 mg/L、0.40 mg/L、0.50 mg/L、0.60mg/L磷标准系列溶液。在分光光度计上用700nm波长比色，以0.00ug/ mL标准溶液为参比溶液仪器零点，由低到高测定标准系列待测液的吸收值。 6.3 测定 吸取空白溶液和待测液2mL～10 mL于50