胃癌化疗多药耐药研究进展.pptx

胃癌化疗多药耐药研究进展 ; 胃癌是我国常见的恶性肿瘤，且中晚期癌(进展期癌)占很大的比例。化疗是其治疗的重要手段之一。由于肿瘤细胞的耐药性，化疗疗效常欠理想。 20世纪60年代末，Biedler和Riehm在中国仓鼠肺细胞上成功地筛选出对放线菌素D耐药的细胞株，这种细胞株对结构与作用机制不同的多种药物，如长春新碱、柔红霉素和丝裂霉素等产生耐药性，此种现象称多药耐药性(multidrug resistance, MDR)。; MDR包括原发性或继发性耐药。原发性耐药指化疗开始时已经存在，继发性耐药指在化疗过程中产生的耐药性。MDR是导致肿瘤化疗失败的原因之一，目前较为明确的机制包括：①多药耐药基因mdr1及其编码的P-糖蛋白(P-glycoprotein,Pgp)过度表达；②多药耐药相关蛋白（MDR-related protein, MRP）基因及其家族MRP2~6的过度表达；③肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein, LRP)的过度表达；④谷胱甘肽S转移酶(GST)的活性增加，⑤DNA拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ, ToPoⅡ)量和质的改变 。; Pgp、MRP和LRP同属细胞膜ATP结合蛋白大家族(ATP-binding cassette superfamily)的成员，是导致肿瘤细胞多药耐药的重要原因。目前已发现该基因家族有五十多个成员。;一、胃癌的化疗; (一)胃癌化疗药物;(二)联合化疗; (三)新辅助化疗; 胃癌术前辅助化疗，对于不能手术的胃癌有效，而且对手术后有肝转移和淋巴结转移者有作用。它能延长患者的生存期。此外，胃癌术前化疗可使胃癌TNM分期减低的作用，如原有肝转移的第Ⅳ期不能手术的胃癌患者，术前化疗后可能使手术成为可能。 常用的药物为5-FU、CDDP、阿霉素、表阿霉素、丝裂霉素、拓扑异物酶抑制剂，CPT-11及VP-16、MTX、Taxol、Taxotere等。一般主张联合应用化疗药物。;二、胃癌多药耐药机制;(一)ATP结合蛋白与胃癌耐药; Pgp是由1280个氨基酸构成，并组成2个同源部分，每一部分包含6个跨膜功能区和1个ATP结合点。跨膜功能区具有疏水性，ATP结合点则为药物的泵出提供能量。如果2个ATP结合点的任何一个失活，则导致细胞的MDR功能丧失。Pgp和己知的许多转运蛋白，如溶血素B、白细胞毒素等的结构和功能相似。抗癌药物通过被动扩散到细胞内，然后与细胞膜糖白结合依靠ATP水解供能而主动泵出细胞外，从而导致肿瘤细胞多种耐药性。; 1992年，Cole等在两种非Pgp MDR细胞株上首先发现一种膜转运蛋白基因过度表达并命名为mrp，其编码蛋白质为MRP，基因定位于16p13.1。mrp与mdr1基因有14%的同源序列。mrp mRNA全长6.5kb，编码1531个氨基酸组成的分子量为190KD的蛋白质。MRP结构与Pgp相似。 MRP和Pgp有19%同源性。MRP碳末端核酸结合位点上末位12个氨基酸为特征性标志，MRP和Pgp在第5、8两个氨甚酸位点上不一致。; MRP家族其他5个成员，分别命名为MRP2、MRP3、MRP4、MRP5和MRP6。MRP6与MRP基因均定位于染色体16P13, 外显子均为31个。编码MRP 3～5的基因与MRP基因不在同一染色体上。MRP基因家族分为两组，一组包括MRP1、MRP2、MRP3和MRP6，氨基酸序列同源性45%～48%，特征为氮末端延伸200个氨基酸与5个胯膜片段结合；另一组包括MRP4和MRP5，与MRP1同源性34%～39%，与Pgp相似，氮来源无上述延伸结构。 ; 1993年Scheper等在肺癌细胞株上发现相对分子质量为110 000的蛋白(LRP)过度表达，并认为是导致该细胞MDR的主要原因。通过荧光原位杂交技术发现LRP基因定位于16号染色体短臂16p13.1～16 p 11.2，与MRP的基因位置相近。LRP基因长2.8kb。LRP基因测序表明，氨基酸序列有87.7%与褐鼠的穹窿体主蛋白(major vault protein，MVP)具有同源性，因此LRP可能是人的MVP。;（2） Pgp、MRP及LRP的组织分布与生理功能; MRP主要分布在肺、肌肉组织、睾丸和外周血单个核细胞内，而在肝脏、大肠、十二指肠、肾脏、卵巢、胎盘和脑组织等表达较低。MRP主要定位于细胞膜上，内质网、高尔基复合体亦有少量分布。MRP的底物是与谷胱甘肽的亲脂性复合物以及阴离子残基，包括白细胞三烯C4、D4、E4，以及S-（2，4-二硝基苯酚)谷胱甘肽。此外，某些两性阴离子化合物，尤其是谷胱甘肽、葡萄糖酸酯及硫酸盐等的偶合物是MRP的底物。; 在剔除MRP