细胞工程_动物细胞工程专业课件.ppt

动物细胞工程;动物细胞培养; 一、动物细胞培养 二、核移植技术;一、动物细胞培养的应用和概念;定义：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。;强调一：细胞贴壁过程;■当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。; 定义： 当原代培养的细胞处于接触抑制后, 用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,然后加入新的培养液,将细胞分离稀释,并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内,这个过程称传代培养.（分瓶培养的过程）;▲细胞株：传代细胞一般能传到40-50代，遗传物质一般不会发生改变，叫细胞株。;3、总结：动物细胞培养过程;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。****;4.动物细胞培养的条件:;9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。*** 10、低头要有勇气，抬头要有低气。**** 11、人总是珍惜为得到。***** 12、人乱于心，不宽余请。**** 13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。***** 14、抱最大的希望，作最大的努力。**** 15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。。***** 16、业余生活要有意义，不要越轨。*** 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。****;问题3：为什么用胰蛋白酶处理？;问题6、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？;5、动物细胞培养技术的应用:;植物组织培养和动物细胞培养的比较：;二、动物体细胞核移植技术和克隆动物;4、体细胞核移植过程—示动物克隆—无性繁殖;;;核移植流程:;4、体细胞核移植技术的应用前景;广而告之： 你还在为身体有残疾而苦恼吗？你还在为器官移植找不到合适的工体而焦虑吗？你能再这样下去了，看看我们的体细胞核移植技术吧，只需要从你身上取出一个小小的体细胞，通过核移植培???出胚胎干细胞，再用胚胎干细胞诱导分化出各种组织器官，这样的器官的组织相容性抗原跟你的一模一样，用这样的器官进行器官移植，根本不会发生免疫排斥。不夸张的说，如果这项技术研究成熟了，以后大家换条胳膊换条腿就跟给汽车换个轮胎一样。你听明白了吗？这不是天方夜谭，巨大的前景就在眼前，你还在等什么呢？赶紧加入到生命科学的研究中来吧！;25;5.体细胞核移植技术存在的问题;动物细胞融合与 单克隆抗体;动物细胞融合;1、定义：也称细胞杂交，是指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。; 基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体 。 来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体。 　　 同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并，称自发融合； 异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合，称诱发融合。; ;动物细胞融合;2、诱导融合的因素 生物法：灭活的病毒诱导融合.(利用灭活仙台病毒是动物细胞融合所特有的。 这是由于病毒的磷脂外壳与动物细胞的膜十分相似的缘故。病毒外壳上的某些糖蛋白可能还有促进细胞融合的功能。) 化学法：聚乙二醇(PEG)诱导融合. 物理法：电激融合;思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？;3、动物细胞融合技术的应用;;人们获得抗体的传统方法是? 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体 这种方法的缺点是什么? 效率低，产量有限，纯度低，动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来产生单一类型的抗体呢？ B淋巴细胞在体外不能无限增殖。;抗原;传统获得抗体方法的缺点： ;单克隆抗体的制备—极富创造性的方案 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子，就是单克隆抗体。 米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝尔奖。;1.如何取得B淋巴细胞？ 2.把B淋巴细胞与骨髓瘤细胞放在一起，有几种融合方式？ 3.如何筛选出所需的细胞? 4.细胞培养有几种方式? 5.如何提取单克隆抗体？;制备单克隆抗体;单克隆抗体制备过程;B; 例：已知细胞增殖时合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。 人淋巴细胞中