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猪O型口蹄疫不同疫苗免疫 抗体消长规律研究
猪O型口蹄疫是由O型口蹄疫病毒引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病,该病传播迅速,发病率高,是世界动物卫生组织(OIE)规定必须报告的传染病之一,我国将其列为一类动物疫病。长期以来,使用猪O 型口蹄疫疫苗免疫接种是我国预防本病的重要措施。为科学制定猪O 型口蹄疫的免疫程序,合理使用猪口蹄疫O 型灭活疫苗和合成肽疫苗,于2014 年在我市绥阳县某种猪场,随机筛选90 头53 ~ 73 日龄仔猪分组进行猪口蹄疫O型灭活疫苗和合成肽疫苗及猪口蹄疫O型灭活疫苗不同剂量免疫后副反应调查、免疫抗体水平和抗体维持时间等相关工作的研究。
1 材料与方法
1.1 试验动物
随机选择53 ~ 73 日龄的仔猪若干头,无菌前腔静脉采血分离血清,用酶联免疫吸附试验检测口蹄疫母源抗体,筛选母源抗体阴性的仔猪90 头为试验动物。将90 头仔猪随机分成A、B、C 3 组,每组30 头,对每头仔猪进行编号。
1.2 试验疫苗
上海某生物医药有限公司生产的猪口蹄疫O 型合成肽疫苗( 多肽2570+7309);兰州某生物科技股份有限公司生产的猪口蹄疫O 型灭活疫苗(O/MYA98/BY2010 株)。
1.3 检测试剂
A 组和B 组用猪口蹄疫病毒O 型抗体检测试剂盒(酶联免疫法),郑州中道生物技术有限公司生产。C 组用O型口蹄疫病毒ELISA 抗体检测试剂盒,武汉科前生物制品有限责任公司生产。
1.4 免疫剂量
A 组每头仔猪耳根后肌肉注射猪口蹄疫O 型灭活疫苗2 mL ;B 组每头仔猪耳根后肌肉注射猪口蹄疫O 型灭活疫苗4 mL ;C 组每头仔猪耳根后肌肉深层注射猪口蹄疫O 型合成肽疫苗1 mL。
1.5 免疫副反应调查
免疫后72 h 内细心观察试验仔猪是否出现采食减少、体温升高甚至死亡等免疫副反应。
1.6 采血时间
分别于免疫后第7 d、15 d、30 d、45 d、60 d、90 d、120 d、150 d 和180 d,进行无菌前腔静脉采血并分离血清,4 ℃保存,次日检测。
1.7 抗体检测
酶联免疫吸附试验。按检测试剂盒使用说明书操作、判定。A 组和B 组:样品OD450nm 值≥ Cut Off 值时判为阳性;样品OD450nm 值< Cut Off 值时判为阴性;C 组:样品OD630nm 值≥ 0.4时判为阳性;样品OD630nm 值< 0.4 时判为阴性。
2 结果与分析
1) 免疫副反应调查结果见表1 和图1,本试验共有28 头猪出现了不同程度的免疫副反应,表现为精神沉郁、体温升高、呕吐和腹泻,其中A 组6 头,B组22 头,C 组未见免疫副反应,28 头猪均在72 h 内自愈。
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