基因工程选修三DNA重组技术的基本工具.pptx

;;苏云金芽孢杆菌;; 按照人们的愿望，在DNA分子水平上进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。;别 名;基因工程操作依据的理论基础;棉花细胞 (不能抗虫);项 目;;限制酶作用的化学键;项 目;DNA1;项目;复习;;项目; 已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因，现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么？请设计实验、预期实验结果，并得出相应的实验结论。;;;三大工具;非编码区;非编???区;;;（一）目的基因主要是______________________。;1.基因文库：;提取某种生物的全部DNA;某种生物的单链mRNA;文库类型; 1.概念：PCR全称为_________________，是一项 在生物______复制_______________的核酸合成技术。 ;四种脱氧核苷酸(dNTP) ;变性（90℃-95℃）：目的基因DNA受热变性后解链为单链；;5.过程;PCR技术扩增与DNA复制的比较;蛋白质的氨基酸序列;1.目的：;2.基因表达载体的组成：;（一）转化： ;1、将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点：;③过程：;（2）基因枪法 （3）花粉管通道法;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ③常用的动物受体细胞：受精卵和卵细胞 ;3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： ;（二）方法;四、目的基因的检测与鉴定;2、检测目的基因是否转录出了mRNA;（二）鉴定（个体生物学水平）;人体细胞;获取目的基因 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 化学方法人工合成目的基因 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 植物、动物、微生物 目的基因的检测与鉴定 检测：分子水平是否插入、转录、翻译 鉴定：个体水平 ;基因工程的基本工具？ 限制酶的特点？ DNA连接酶和载体的种类？ 基因工程的基本操作程序？ 获取目的基因的方法？ 基因工程的核心步骤是？ 基因表达载体的组成？ 将抗虫基因转移到棉花细胞中遗传和表达称为？ 将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法？ T-DNA的特点？ 目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键？ 目的基因的检测与鉴定的方法？;;一、植物基因工程硕果累累;(一)抗虫转基因植物;;(二)抗病转基因植物;;(三)抗逆转基因植物;(四)利用转基因改良植物的品质;;二、动物基因工程前景广阔;3.用转基因的动物生产药物;获取目的基因（例如血清蛋白基因）;4.用转基因的动物作器官移植的供体; 三.基因工程药品异军突起;　　作用：胰岛素是治疗糖尿病的特效药。 传统生产方法： 主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。产量低，价格昂贵。 　　基因工程方法：1979年，科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组，并在大肠杆菌内实现了表达。 　　1982年，美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场，售价降低了30%~50%。 ;基因工程药品 —— 干扰素;基因工程药品 —— 生长激素;四、基因治疗曙光初照;3）基因治疗的方法;4）用于基因治疗的基因种类;多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图。据图回答下列问题：(原生质体是去掉细胞壁的植物细胞);(1)若已获取PG的mRNA，可通过________获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是__________________________________________________________________。;(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有________的培养基进行筛选，理由是________________________。之后，还需将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。;(3)由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与________互补结合，因此可抑制PG基因表达的翻译过程。若______________，则可确定转基因番茄培育成功。;;知识回顾;1;例如：;1;与基因工程的关系：;蛋白质工程流程图：;蛋白质工程的主要步骤通常包括：;某多肽链的一段氨基酸序列是： ……丙氨酸-色氨酸-赖氨酸-甲硫氨酸-苯丙氨酸……