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(3) 切除内含子(intron cleavage ) snRNA(核内小RNA)参与切除内含子。 snRNA的功能类似一个暂时的模板,它使两个外显子转录的RNA片段的末端靠在一起,为正确位点拼接作准备,一个拼接错误可使mRNA下游区的遗传密码改变,造成产生不完善蛋白分子的不良后果。 U1:一组小的核内核糖核蛋白( snRNP ) 功能为剪接核内mRNA前体。由几条多肽链和一个RNA分子组成,含有一个互补于内含子的接纳体-供体连接点的片段。 已确定的其他成员包括U2 、U4、U5和U6。 学习文档 GT-AG规律:内含子的碱基以GT开始, AG终止。 (对应于RNA为GU-AG) GT-AG规律只适合于绝大多数真核生物编码蛋白质的核基因! 学习文档 学习文档 (4) 修饰(modification): 对某些碱基进行甲基化。 主要是N6-甲基腺嘌呤,可能对mRNA 前体加工起识别作用(对翻译不是必需的). 学习文档 二、RNA的复制 (RNA指导的RNA合成) 某些RNA病毒 (如大肠杆菌噬菌体f 2, MS2, R17, Qβ和灰质炎病毒), 可以以自身RNA为模板进行复制。 (一)RNA复制酶 宿主细胞中由RNA指导的RNA聚合酶, 称RNA聚合酶或RNA复制酶。这类酶在感染时才由宿主产生。 RNA链合成方向: 5′→3′ 模板:只以病毒RNA为模板, 不能以宿主RNA为模板。 学习文档 RNA病毒复制的两个阶段 (1)其单链RNA可充当mRNA,利用寄主中的核糖体合成外壳蛋白和复制酶的β亚基。 (2)复制酶的β亚基可与来自寄主细胞的亚基α?δ自动装配成RNA复制酶,可进行RNA的复制,以分子中单链RNA为模板(正链),复制出一条新的RNA链(负链),再复制出正链,与外壳蛋白组装成新的噬菌体颗粒。 5 ? RNA- 5 ? 3 ? 3 ? RNA+ 释放 释放 3? 5 ? 3 ? 3 ? 5 ? 5 ? RNA+ RNA+ RNA- RNA-及 RNA+的合成方向均为5’ →3’ 正链RNA:用做翻译模板的mRNA; 负链RNA:与正链互补的RNA 学习文档 学习文档 不同的RNA病毒复制方式不同。 学习文档 三、多核苷酸磷酸化酶(无模板的RNA合成) (自学内容) n NDP ( NMP ) n + n Pi 多核苷酸磷酸化酶 学习文档 学习文档 * * * * 学习文档 (3)RNA链的延长 DNA分子和酶分子发生构象的变化,核心酶与DNA结合比较松弛,沿DNA模板移动,并按模板顺序选择下一个核苷酸,将NTP加到生长的RNA链的3′-OH端,催化形成磷酸二酯键。转录延伸方向从5′?3′。 学习文档 , 17bp 学习文档 学习文档 (4)转录终止 RNA聚合酶遇到DNA模板上触发终止转录的特殊位点(终止子), 停止转录, 并释放出聚合酶和RNA转录产物。 终止子: 提供转录终止信号的DNA序列。 终止因子: 协助RNA聚合酶识别终止信号的辅助因子(蛋白质)。 终止子结构特征:在终止点之前均有一个回文结构, 其产生的RNA可形成由茎环构成的发夹结构, 该结构使RNA聚合酶延伸速度减慢或停止。 学习文档 终止方式: 不依赖ρ因子的转录终止(简单终止子或强终止子) 特点: 1)在终止点之前具有一段富含G-C的回文区域。2)富含G-C的区域之后是一连串的dA碱基序列,它们转录的RNA链的末端为一连串U(连续6个)。 学习文档 学习文档 不需要ρ因子的终止机制 学习文档 RNA聚合酶到达终止子的时候暂停; 暂停使发夹结构有时间形成; 发夹结构破坏了RNA聚合酶和它的RNA产物之间的作用; 富含U的序列很容易与模板链解离; 转录复合物解体,转录终止。 不需要ρ因子的转录终止 学习文档 b. 依赖ρ 因子的转录终止(弱终止子) ------必需ρ因子存在时才能发生终止作用. 特点: 终止子后无连续的A,无回文区域或回文区域短。在ρ因子作用下,ATP酶水解,释放能量,使新生RNA与模板脱落。 学习文档 依赖ρ因子的转录终止 学习文档 学习文档 真核细胞的RNA聚合酶 酶类 分布 产 物 分子量 反应条件 Ⅱ I Ⅲ 核仁 核质 核质 5.8SrRNA 18SrRNA 28SrRNA mRNA、多数核内小RNA tRNA 5S rRN
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