流式细胞仪在农牧业中的应用.pdf

流式细胞术在农牧业中的应用 一, 应用于植物倍性和辅助细胞育种 以有性杂交、 人工多倍体进化育种和单倍体、 非整倍体和植物远缘渐渗杂交技术 进行现代分子育种优质、 高产改良品种或新品种过程中， 必须对得到的新品种的 倍性数量进行精确分析来评价是否已获成功。 贝克曼库尔特公司的流式细胞仪产品 (EPICS XL, FC500, EPICSALTRA，Quanta SC) 和多功能细胞分析仪 CellLab Quanta 有激发多种波长的光源，能够利用所有各 种不同的荧光素对亲代和子代品种的染色体的倍性进行鉴定， 从而得到杂交的比 率。 主要用途如下： ? 可以进行各种动植物细胞的倍体分析 ? 可以测定的细胞种类包括植物的根、茎、叶、花粉等各种组织，动物的各 种细胞 ? 可以进行各种细胞表面蛋白表达和胞浆细胞器分析 ? 可以分析凋亡 ? 可以精确测定细胞体积大小， 检测细微的细胞大小的改变， 同时能区分细 胞碎片、单个细胞和粘联细胞 ? 测定细胞大小范围广， 0.8-40um ，适合不同的细胞分析 ? 可以对细胞进行绝对和相对计数进行定量分析 结果举例： 流式细胞仪是分析 DNA精度最高的分析工具，能用的染料最多，并且能同时得到细 胞大小的精确信息 Diameter MCV Counts Pct Mean1 Mode1 CV1 Color G1 5.4 82 11,633 57.93% 295.862 290 5.901847 S-Phase 5.9 108.8 4,947 24.64% 408.461 353 11.78082 G2 6.3 129.5 1,554 7.74% 530.902 528 4.407565 Quantz 分析细胞周期和对应的细胞大小 烟叶 烟叶和内对照 拟南介 小麦胚乳 流式细胞仪 倍性分析结果 二, 在农牧业应用和基础研究的其它用途为 : ? 食 用 动 物 的 免 疫 功 能 检 测 。 主 要 包 括 细 胞 免 疫 中 淋 巴 细 胞 亚 群 （CD3,CD4,CD8等）的监测，来探索饲养和管理方式对食用动物抵抗疫病 能力的影响 ? 动物产品质量的评估。可以通过动物产品（奶类，肉类）使用者免疫功能 的变化（ T 细胞， B 细胞， NK细胞等）来评价质量 ? 残留对食用动物和人类细胞增值，细胞分化和细胞凋亡的影响 ? 人兽、人禽共患病病原（如禽流感、 SARS,寄生虫等）对食用动物和人类 致病性机理的基础研究 ? 生殖细胞干祖细胞通过分选得到纯度和活性很高的单一细胞， 进行激素引 起的 基因表达以及与细胞增殖、分化和凋亡之间关系；进行营养分子对动物繁殖机 能，包括胚胎发育的影响；进行食源性抗氧化剂缓解内分泌干扰物 (EDC) 生殖毒性 作用及其机理的研究 ? 分选 X 染色体进行人工受精研究提高雌性奶类动物的出生比例来提高经 济效益 流式细胞分析分选系统结果示例： 对细胞免疫 T 细胞进行定量评估