高效液相色谱仪使用说明.pdf

高效液相色谱仪使用说明 1. 型号： LC-10AT 产地 日本岛津 。 2. 用途： 高效液相色谱法只要求样品能制成溶液 , 不受样品挥发性的限制 ,流动相可选择的范围宽 , 固定相的种类繁多 ,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、 离解的和非离解的以及各种分子 量范围的物质。 与试样预处理技术相配合， HPL C 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定 性质上十分相近的物质成为可能， 能够分离复杂相体中的微量成分。 随着固定相的发展 , 有 可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。由于 HPL C 具有高分辨率、高灵敏 度、速度快、色谱柱可反复利用 , 流出组分易收集等优点 ,因而被广泛应用到生物化学、食 品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用 是一个重要的发展方向。 3. 测定原理 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。 储液器中的流动相被高压泵打入系统， 样品溶液经进样器进入流动相 ,被流动相载入色谱柱 (固定相 ) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数 , 在两相中作相对运 动时 , 经过反复多次的吸附 - 解吸的分配过程 , 各组分在移动速度上产生较大的差别 , 被 分离成单个组分依次从柱内流出 , 通过检测器时 , 样品浓度被转换成电信号传送到记录 仪，数据以图谱形式打印出来。 4. 使用方法 4.1 系统组成：本系统由 1 个 LC-10ATvp 溶剂输送泵、 Rheodyne 7725i 手动进样阀、 SPD-10Avp 紫外 -可见检测器、色谱数据工作站和电脑等组成，另外还包括打印机、不间 断电源等辅助设备。 4.2 准备 4.2.1 准备所需的流动相，用合适的 0.45 μm滤膜过滤，超声波脱气 20min 。 4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。 4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制） ，用合适的 0.45 μm滤膜过滤。 3.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常，特别注意输液管道内 是否有气泡。 4.3 开机：接通电源，依次开启不间断电源、溶剂输送泵、先将机器预热半小时，这时 的流动相用 85％甲醇溶液（已脱气） ，而且要时刻注意输液管道内是否有气泡，如有气泡 要进行排气。预热半小时后，开启检测器，待检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示 器、主机，最后打开色谱工作站。 4.4 各种参数设定 4.4.1 波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按 [func] 键，用数字键输入所需波长值，按 [Enter] 键确认。按 [CE] 键退出到初始屏幕。 4.4.2 流速设定：在输送泵显示初始屏幕时，按 [func] 键，用数字键输入所需的流速（柱在 线时流速一般不超过 1ml/min ），按 [Enter] 键确认。按 [CE] 键退出。 4.5 更换流动相并排气泡 4.5.1 将输送管道的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶（已排气）中； 4.5.2 逆时针转动泵的排液阀 180 度，打开排液阀； 4.5.3 按泵的 [purge] 键， pump 指示灯亮，泵大约以 2ml/min 的流速冲洗， 3min （可设定） 后自动停止； 4.5.4 将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。 4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。 4.5.6 如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为 5ml/min ，按 [pump] 键，冲洗 3min 后再按 [pump] 键停泵