UV 紫外课件分光光度计简介 分析化学.pptVIP

（二） 纯度检查 杂质检查 杂质限量检测 用稀盐酸配制2mg/mL肾上腺素药品溶液，用1cm吸收池，在310nm处测定吸光度值。规定测得的A应小于0.05，相当于酮体含量不超过0.06%。 1－肾上腺素；2－肾上腺酮 （三） 定量分析中的应用 依据是朗伯-比尔定律和吸光度加和性。 溶剂的透明范围P34 常见溶剂可用于测定的最短波长 可用于测定的最短波长(nm) 常见溶剂 200 蒸馏水，乙腈，环己烷 220 甲醇，乙醇，异丙醇，醚 250 二氧六环，氯仿，醋酸 270 N,N-二甲基甲酰胺，乙酸乙酯，四氯化碳 290 苯，甲苯，二甲苯 335 丙酮，甲乙酮，吡啶，二硫化碳(380) 吸光系数法 直接比较法 CX/CS＝AX/AS 校正曲线法 1.单组分定量 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度。 吸光系数法 单组分的测定 参比 标准样品 待测样品 校正曲线法 校正曲线（求线性范围） 仪器测量误差 误差来源：入射光源不稳定 吸收池玻璃的厚度不均匀 池壁不平行，表面有水迹，油污或划痕 光电池不灵敏，光电流测量不准确 误差影响：透光度读数误差 如何确保测量准确 仪器精密度,校正,吸收池 参比溶液——举例 澄清 溶液浓度 吸收波长 测定吸光度值并归零 内含溶剂、显色剂以及其他进行显色反应必要的试剂 1.电子轨道的形成 ? ?? 氢分子的成键和反键轨道 （二）电子跃迁的类型 n →σ* n →π* π* σ σ* ↓↑ ↓↑ ↓↑ n π π→π* σ→σ* 2.跃迁类型 π→π* 共轭引起的吸收带红移 乙烯lmax = 185nm 丁二烯lmax = 217nm 己三烯lmax = 258nm 下列化合物中，在近紫外光区中有两个吸收带的物质是哪个？?? A．丙烯；??B．丙烯醛；? ?? C．1，3－丁二烯；?D．丁烯 下面几个化合物中跃迁所需能量最大的是（ ） A、1，4－戊二烯 B、1，3－丁二烯 C、1，3－环己二烯 D、2，3－二甲基－1，3－丁二烯 1.吸收光谱(吸收曲线) （三） UV-vis的特点和 基本术语 2.生色团、助色团 生色团（chromophore） C＝C、C＝O等(含有π电子，都发生π→π* 或n→π*跃迁); 助色团（auxochrome） 如，－OH、－OR等(含有饱和的杂原子)。 3.红移、蓝移 吸收强度 红移或长移 (red shift 或bathochromic shift) 蓝移（blue shift或hypsochromic shift） 或紫移，或短移： R带:n →π* ； 270～300nm,吸收强度弱 丙酮?max =279nm， εmax=15； 随溶剂极性增加，吸收波长蓝移（短移）； K带 共轭π→π* ； 吸收强度强 随溶剂极性增加，吸收波长红移（长移）。 4. 吸收带 E1、E2和B带 如： E1 E2 B 苯 184nm 204nm 256nm (ε6×104) (ε7900) (ε200） 苯酚 210nm 270nm。 (ε6200) (ε1450） 二. 紫外－可见分光光度计 （一）基本组成 general process 光源 单色器 样品室 检测器 显示 1. 光源 可见光区：钨灯，320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400nm的连续光谱。 2.单色器 ①入射狭缝 ②准光装置 ③色散元件 ④聚焦装置 ⑤出射狭缝。 3.样品室 紫外区须采用石 英池，可见区一般用玻璃池。 4.检测器 5. 结果显示记录系统 （二）分光光度计的类型 types of spectrometer 单光束分光光度计 双光束分光光度计 双波长分光光度计 类型 755s分光光度计 （上海产，有氘灯，可测量紫外区吸收） 紫外-可见分光光度计 （美国热电公司） 查阅文献 原理、优点 三. 紫外光谱的应用 （一） 定性鉴别 依据 吸收光谱的特征； 方法 对比法； 比较?max 和εmax（或E 1%） 比较不同吸收