蛋白相互作用PullDown实验.doc

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PAGE PAGE 2 蛋白相互作用Pull-Down实验 实验原理:Pull-Down技术是通过蛋白相互作用来研究细胞通路的有力工具。是确定两种或更多蛋白之间相互作用的体外方法。Pull-Down实验可用来检测已知的蛋白相互作用条件,并且可用来筛选未知的蛋白相互作用。 用作诱饵的蛋白是重组蛋白,会含有一个用于纯化的亲和标签。这个融合标签就是用于Pull-Down实验的基础。最常见的标签为谷胱甘肽S-转移酶(GST)和多组氨酸(6×His)。其分别使用固相化的谷胱甘肽和固相化的金属螯合物亲和配体(如Ni2+和Co2+)。 实验准备: 实验仪器:谷胱甘肽琼脂糖凝胶(镍离子琼脂糖凝胶)、离

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