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一、做ELISA确定抗原最佳包被浓度,做方阵滴定具体怎么做呢?
选择好一份已知为阳性和阴性背景的标本,将你的抗原用1*CB PH=9.6或1*PB PH=7.4进行倍比稀释(8个条件)后加入96孔板每孔100ul。(一般包被浓度100ng抗原或抗体/孔,最优包被条件需进行试验选择)4度过夜取出后甩干,加入20%NBS封闭每孔200ul。37度2h热封,甩去后拍干即可。将你HRP或AP标记的抗原或二抗用酶标稀释液进行稀释(倍比稀释4个梯度)即可。棋盘滴定就是板酶交叉,同时带上阳性、阴性通过试验确定最佳P/N的包被搭配E的试验
2.抗原和抗体最佳工作浓度的确定
抗原
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