PBMC的分离培养及处理步骤.doc

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PAGE PAGE 1 刘凤君实验步骤 1.采血:抽取初治(初始抗病毒治疗)之前CHB、CHC患者外周静脉血6ml,注入肝素抗凝管中,轻轻摇匀。 2.稀释:室温下加入等体积的PBS,轻轻吹打混匀。 3.加样:取50ml离心管,吸取6ml Ficoll(淋巴细胞分离液)于离心管中,(Ficoll与稀释前血液的体积比为1:1),管倾斜45°,将稀释后的血液在Ficoll液面上方约1cm处沿管壁缓慢加至Ficoll上面。 4.离心:18-20℃,2000rpm,30min,离心后从管底至液面分四层,依次为红细胞和粒细胞层、分层液层、单个核细胞层、血浆层。 5.回收:将移液管直接插入云雾层(或

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