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RT-PCR原理与实验步骤
?一、知识背景:
1、基因表达:DNA??????????RNA????????Protein
单拷贝基因表达存在逐步放大机制,如一个蚕丝心蛋白基因 ????????104个丝心蛋白mRNA(每个mRNA存活4d,可以合成105个丝心蛋白)????????共合成109个丝心蛋白?。因此单拷贝基因的mRNA表达水平对于其功能水平的调控是非常重要的。
?2、PCR技术(Polymerase?chain?reaction):即聚合酶链式反应。
在模板、引物和四种脱氧核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促反应,其特异性由两个人工合成的引物
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