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miRNA常用实验方法
miRNA的检测方法
miRNA的realtime-PCR检测方法
realtime-PCR引物设计
miRNA realtime-PCR引物设计方法:
1)stem-loop RT引物设计:基于通用的茎环结构,只需要按照不同的miRNA序列修改最末端6个碱基即可。通用茎环结构序列为:GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGAC
例如设计miR-1(UGGAAUGUAAAGAAGUAUGUAU)的RT引物,只需在通用茎环序列后架上miRNA3’末端的6个碱基的反向互补序列,即
GTCGTATCC
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