第五章药物定量分析与分析方法的验证新.pptx

第五章药物定量分析与分析方法验证;Contents;第一节 药品分析方法的验证;需验证的分析项目 1.鉴别试验 2.杂质定量或限度检查 3.原料或制剂中有效成分含量测定 4.制剂中其他成分（降解产物、防腐剂）的测定 5.溶出度、释放度等功能检查中的溶出量等的测试方法。;四. 验证内容 精密度, 准确度, 检测限,专属性，定量限， 线性、范围和耐用性;（一）、准确度（accuracy） ;回收试验 ：空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M R=M（平均）/A *100% ;加样回收试验：已准确测定药物???量P的真是样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M;数据要求：规定的范围内，至少用9次测定结果评价，如制备三个不同浓度样品各测三次;二、精密度(Precision);三、专属性(Specificity);五、定量限(Limit of Quantitation, LOQ);六、线性;精密称取大黄素对照品约17.29 mg,，置50 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为大黄素对照品储备液。精密吸取 储备液0.2、0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、9.0mL分别置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件，分别进样10 μl，记录峰面积，以峰面积 ( y ) 为纵坐标、大黄素浓度 ( x ) 为横坐标进行线性回归，得回归方程。 Y = 2.962 106 X － 4.958 103 r = 0.999 9 结果表明大黄素溶液在 6.92 μg·mL - 1 ~ 311 μg·mL - 1之间呈良好的线性关系。;标准曲线与线性范围;七.范围 达到一定精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。;测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度 影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和pH，商品柱的品牌，柱温等 ;①;各种含量测定方法对效能指标的要求;; 一.含金属的有机药物分析 (一)、结构分析;2.金属直接和碳原子相连的有机金属药物 ;(二)、含量测定;2.含锑药物（水解后测定法） 如：葡萄糖酸锑钠 ;二、经有机破坏的分析方法;原 理;凯氏烧瓶;(二)干法破坏;2.氧瓶燃烧法;第一节 定量分析样品的前处理方法;操作方法;③样品的燃烧 点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，待燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、检查或含量测定。;④吸收液的选择;⑤注意事项： （1）充氧气，使瓶内空气排尽 （2）测定含氟有??药物时，用石英制燃烧瓶 （3）铂丝燃烧时起催化作用 （4）应同时做空白试验 （5）燃烧时要注意防爆 （6）燃烧要完全 （7）燃烧产生的烟雾完全被吸收;2.在药物含量测定中的应用 碘苯酯的含量测定;第三节 定量分析方法的特点;二.光谱分析法 1.紫外可见分光光度法 朗伯比尔定律 2.荧光分析法 物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长长的荧光。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定的时候，物质在一定浓度范围内，其荧光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可用来进行定量分析。 ;特点： （1）灵敏度高，10-12~10-10g/ml （2）荧光自熄灭 （3）对于容易被光分解的样品，为了避免因激发光多次照射而影响荧光强度，我们可以选择一种激发光的波长与它近似的而对光稳定的物质配成适当浓度的溶液，作为基准溶液。 （4）采用荧光衍生化试剂，使没有荧光或者荧光比较弱的物质和一种荧光试剂发生反应，得到一个强的荧光产物，来提高分析方法的选择性。 ;三.色谱分析法 1.HPLC法 系统适用性试验：即用规定的对照品对色谱系统进行实验和条件 ①色谱柱的理论塔板数： 在规定的色谱条件下，注入供试品溶液或各种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间TR和半峰宽Wh/2,按n=5.54(tr/wh/2)2计算色谱柱的理论板数。;②分离度（R） 无论定性鉴别或定量分析，均要求待测峰与其人峰、内标峰或特定的杂货对照峰之间有较好的分离度。 除另有规定外，定量分析时分离度应大于1.5。 ③重复性 取各品种项下的对照常溶液，连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0%。;④拖尾因子（T） 为保证分离效果和测量精度，应检查待测峰的拖尾因子是否符合各品种项下的规定。 除另有规定外，峰高法定量时T应在0.95~1.05之间。峰面积法测定时，T值偏离过大，也