第3章生物化学检验实验室基本知识湖北中医学院.pptx

第二章 生物化学检验实验室基本知识 ;本章内容概要：;教学目的和要求：;第一节 实验用纯水;实验室用水等级 纯水的制备方法 水的纯度检查 ;一、实验室用水等级; 表2-2 中国国家验室用水GB6682-2002标准 ;二、纯水的制备方法;（一）蒸馏法;(二) 离子交换法;氢型强酸性阳离子交换树脂?(R—SO3H，R为母体)?，其中的H+与Ca2+、Na+等金属离子发生交换反应，而将钙、钠离子除去 ;优点: 除了可去除杂质离子以外兼具吸附电中性杂质和过滤颗粒杂质的作用。;（三）其他方法：; 1、不需要消耗化学药品，设备???单，操作方便。 ;炭吸附法:;1、设备简单，操作方便。 ;超滤膜法;混合纯化系统;三、水的纯度检查 ;第二节 常用临床实验室器材;工作原理; 1.选择在移液范围内的加样器，若为可调式则先将容量调节到所需的容量上。 2.将吸头套在加样器的下端，轻轻转动后牢固地套上，确必威体育官网网址封。 3.正式使用前需连续按动数次（不吸液体），以保持腔内外气压一致。 4.用手垂直握住加样器，拇指将按钮压至第一停点（第一档位），并将吸头浸入到液面下1～3mm，再缓慢地放松按钮使之复位，等待1～2s后从液体中取出时拖靠掉吸头外部残液于被取出的容器内壁中。注意避免吸头与其他任何东西碰撞。 5.将吸头移到加样容器内壁上，轻轻地将按钮压至第一停点将液体排出，等待1～2s，再把按钮压至第二停点（第二档位），排尽全部液体后，吸头应沿容器壁向上滑动取出，此时拖靠吸头内部残液于加样容器内壁中。再放松按钮使之复位，卸下吸头，完成一次操作过程。;第三节 生物化学检验试剂概述; 一、化学试剂的种类与保存 ;（二）化学试剂的保存 ;二、化学试剂的配制 ; ①固体试剂恒重后准确称量 ②液体试剂取量时选择合适的量器准确吸取要求的体积 ③试剂配制的溶剂一般为蒸馏水或去离子水，应注意对蒸馏水 的要求，若需其他溶剂则需注明清楚。 ④各类试剂分别溶解后按要求顺序混合，最后稀释至刻度。 ⑤配制好的试剂应在其容器上注明名称、浓度以及配制时间。 ;三、试剂盒的选择及评价;（一）试剂盒的选择;冻干型试剂：试剂溶解后先分装成液体，再经冻干处理而成 ; （二）试剂盒的评价 ;稳定性试验;第四节 参考范围和医学决定水平;临床生化检验项目的结果的临床意义 ;、参考范围;(所有参考值剔除离群值并补充数据后在95％的分布范围) ;建立的注意事项：;（二）参考范围概念的正确使用;二、医学决定水平;特点：不同指标的ＭＤＬ的数量和数值不同;血清清蛋白（Alb）有三个DL，分别是20g/L、35g/L、52g/L。 其中20g/L表示肝病患者的预后严重； 35g/L为检查低清蛋白血症的界值； 52g/L则稍高于参考范围上限，可除外许多假阳性。 ;第五节 实验方法与参考物质概述;决定性方法;一、实验方法的分级 ;（二）实验方法的分级;;应用： 由于技术要求太高，费用昂贵 只用于产生一级测量程序、评价参考方法。 不直接用于鉴定常规方法的准确性 ;2.参考方法（reference method）;应用： 主要用于鉴定常规方法，评价其偏差、干扰因素，并决定是否可以被接受； 产生二级参考测量程序（适合于分析复杂生物样品 ） 用于鉴定二级参考物和为质控物定值； 用于商品试剂盒的质量评价； 参考方法可以产生出更低等级的厂家选定测量程序、厂家常务测量程序、用户常规测量程序，分别为厂家工作校准物、厂家产品校准物和常规标本定值。;国际约定参考测量程序 (international conventional reference measurement procedure) ;3．常规方法（routine method） ;应用： 临床常规检验使用 常规方法在作出评定以后，经有关学术组织认可，可以作为推荐方法（recommended method ） 产生用户常规测量程序 ;二、参考物质的分级;溯源性(traceability)、溯源链; 溯源链的理想终点是SI单位的定义，但目前只有少部分检验项目可以溯源至SI单位 ;（二）参考物质的分类与分级; 参考物质可以是纯的或混合的液体、固体（如镨钕 滤光片）或气体（如标准的CO2气体）。;分级：根据参考物质的校准性质分为：;（二级校准物、次级参考物、二级标准品）;3．工作校准物(working calibrator)(一般参考物质） ;国际约定校准物质 ;决定性方法;第六节 实验方法的选择与评价;实验误差 方法学评价指标 实验方法选择与评价的原则、内容和步骤 方法学评价试验 方法性能判断 ;、实验误差;1.系统误差（systematic error，SE