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(一)湿热消毒灭菌法 1.巴氏消毒法(pastearization) 61℃ -62.8℃ 30min,71.7℃15-30s 杀死 用于杀死啤酒中乳酸菌,牛奶中结核杆菌。 2. 高压灭菌法 1.05kg/cm2 121.3℃ 15-20min 杀死芽孢。 用于不怕潮湿耐高温的物品的灭菌,如手术敷料、培养基等。 . 3.煮沸和流通蒸气法 100℃15-30min杀死繁 殖体。细菌芽胞需3~5小时。 4.间歇灭菌法(fraction sterilization) 可杀死芽胞。 用于含血清培养基等. (二) 干热灭菌法 1.焚烧法 2.烧灼法 3.干 烤灭菌法 160℃2小时可杀死一切微生物。并可破坏内毒素(热原质)。 用于玻璃器皿灭菌。 二. 日光和紫外线 应用: 主要用于杀灭空气 和物体表面的细菌、 真菌和DNA病毒。 紫外线 ultraviolet ray,UV 波长265-266nm 杀菌作用强。 紫外线杀菌机理: 干扰DNA复制。 杀菌特点: 穿透力差、 对眼睛皮肤有损伤 大计量 诱发皮肤癌。 日光杀菌:干燥和紫外线 紫外线预警预报 三. 电离辐射 Χ射线、 γ射线(如60Co ) ?射线 杀菌特点: 穿透力强 常用于一些不耐热物品的消毒灭菌。 如一次性医用塑料制品、生物制品、药品等. 产生自由基;破坏DNA 复制,损伤细胞膜。H2O2杀菌。 四.滤过除菌 滤器(filter)可除去液体中的细菌。 玻璃滤器: 玻璃砂筛板, G5、G6 有除菌作用。 薄膜滤器: 硝化纤维素膜, 0.22um孔径的 滤膜为好。 应用:适用于血清、培养液的除菌。 五. 超声波和反复冻融 1.超声波 20-100KHz可破坏细菌结构引起死亡。 用于餐具消毒和提取细菌组分。 2.低温后反复冻融 有一定灭菌作用。 低温主要用作防腐和保存菌种。 六、其他物理抑菌或杀菌方法 1.低温 低温可降低病原生物的新陈代谢,抑制其生长繁殖。 利用低温反复冻融也有一定的消毒灭菌作用。 2.高渗 高渗可造成病原生物脱水,新陈代谢停止。 3.干燥 干燥也就是脱水,形成高渗环境,抑制病原生物的新陈代谢。 4.冷冻真空干燥法(lyophilization) 在低温状态下真空抽去水分,该法是目前保存菌种的最好方法一般可保存微生物数年至数十年。 第二节 化学消毒灭菌法 有化学消毒剂和防腐剂两种。 一、化学消毒剂: 为原生质毒,只能外用 一 )种类与应用: 1.醇类 70%乙醇效果好, 用于皮肤、体温计 等消毒。 一、化学消毒剂: 2.酚类 3%~5%石炭酸。 用于皮肤、地面 和病人排泄物消毒。 3.表面活性剂 0.1% 新洁而灭。 用于皮肤黏膜消毒, 术前洗手,浸泡器械。 4.氧化剂 0.1%高锰酸钾- 用于皮肤、尿道, 清洗水果蔬菜 3%过氧化氢- 用于深部创伤、 外耳道 0.2%~0.5% 过氧乙酸- 用于塑料、玻璃和 人造纤维消毒灭菌 一.化学消毒剂: 一.化学消毒剂: 5.卤素 0.2-05ppm氯-用于 饮水消毒; 漂白粉- 用于地面厕所 和排泄物消毒; 2.5%碘酒-用于 皮肤、手术 部位消毒; 1%碘伏- 用于皮肤 黏膜消毒。 消毒剂的效果次序 1.高度消毒剂: 戊二醛、过氧化氢、过氧乙酸、环氧乙烷、二氧化氯。用于不易灭菌的物质(内窥镜等塑胶器材)。 2.中度消毒剂: 酒精、碘化物、酚醛化物。用于清除器具的表面。 3.低度消毒剂: 洁而灭。用于处理非精密性器具。 二、防腐剂 1.叠氮钠、氯仿、 硫柳汞等 用于生物制剂、 制药等防腐。 能抑制细菌株生长,延长保存时间。 2.山梨醇和苹果酸钠等 用于食品与饮品的防腐。 种类与应用 三.影响消毒灭菌的因素 1.细菌的数量和种类 数量多应延长作用时间,增加浓度。芽孢抵 抗力强。 2.温度 增加温度,可提高消毒剂的效果,缩短时间。 3.pH应适宜,如戊二醛在碱性条件下效果好 4.有机物影响杀菌效果。 5.增加消毒剂浓度,杀菌所需时间则缩短。 生物安全 (一)生物危害程度的分级 分为四级: I级:指危害性最低的微生物和寄生虫等生物因子。其绝大部分不感染人类。 Ⅱ级:指中等危害性的生物因子。 所致的感染有有效药物或疫苗用于防治。伤寒杆沙门菌、霍乱弧菌,铜绿假单胞菌、各型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)、以及弓形虫等均属于Ⅱ级。 Ⅲ级:指那些可能通过气溶胶感染或能导致严重后果的生物因子。 其所致的感染和疾病,可以用抗生素等药物治疗,有些可以用疫苗预防。例如结核杆菌、炭疽芽胞杆菌、霍乱弧菌、鼠疫耶氏菌、布鲁氏菌,各型脑炎病毒、出血热病毒和贝纳柯
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