GPC3-CAR-T回输制剂生产工艺的研究资料及验证资料.pdf

申请分类：新药 注册分类：治疗用生物制品1类 药品名称 靶向GPC3的自体CAR-T细胞回输制剂 资料项目名称 生产工艺的研究资料及验证资料 资料项目编号 申请机构： 申请机构地址： 申请机构电话： 申请机构主要研究者姓名： 试验者姓名： 试验起止日期： 原始资料的保存地点： 联系人姓名、电话： 药品注册申请人名称： 目 录 1 靶向GPC3 的自体CAR-T 细胞 1 2 培养基的选择 1 2.1 研究背景 1 2.2 仪器设备 2 2.3 实验方案 2 2.4 结果讨论 2 3 制备工艺路线的选择 3 3.1 实验方案 4 3.1.1 实验步骤4 3. 2 实验结果 6 4 生产过程主要工艺参数和质控参数 7 4.1 生产过程主要工艺参数7 4.2 生产过程主要质控参数 8 5 生产工艺的验证 10 6 生产过程的无菌控制 10 缩略词对照表 序号 缩略词 全称 1 GPC3-CAR-T 靶向GPC3 的自体CAR-T细胞 2 HSA 人血清白蛋白 3 YG-M-C 培养基 4 YG-PS-A 保存液 新药治疗用生物制品1 类 9. 生产工艺的研究资料及验证资料 第 1 页 共11 页 靶向GPC3的自体CAR-T细胞回输制剂 生产工艺研究资料及验证资料 本注册申报资料拟对靶向GPC3 的自体CAR-T 细胞回输制剂的生产工艺和贮藏 条件进行研究，采用悬浮培养法，经过分离、分选、培养、激活、扩增、收获等步骤 制得的细胞悬液，含适量保存液。建立了一套从分离培养至细胞制剂的标准生产工艺 方案和质控方法，为靶向GPC3 的自体CAR-T 细胞回输制剂成品提供质量可控的细 胞来源。 1 靶向GPC3 的自体CAR-T细胞 本产品属于基因改造的免疫细胞，以GPC3 为靶点，通过将靶向GPC3 的单链抗 体GC33 与共刺激分子CD28、CD137 和CD3 ζ链的胞内信号结构域进行融合重组， 构建抗-GPC3-CD28-CD137-CD3 ζ的慢病毒表达载体，制备GPC3-CAR 分子修饰的T 细胞。 2 培养基的选择 2.1 研究背景 细胞培养是指模拟体内环境，使细胞在体外生长繁殖，并维持其结构和功能的一 种培养技术。常用的细胞培养体系包括细胞培养基，无菌无毒环境，恒定的温湿度等 等。培养基的主要成份为氨基酸，碳水化合物，无机盐，维生素，血清，生长因子以 及其它成份。 胎牛血清是细胞体外扩增时常常采用的培养成份，这种血清带有动物来源的抗原， 会在临床上引起很多潜在的危险，移植到人体内后可能会产生严重的过敏反应和免疫 [1- 3] 排斥反应。其他的危险性包括病毒和细菌感染、朊病毒和未知的动物传染病 。 有报道采用异基因的人血清、富含血小板的血浆和人血小板裂解物来培养扩增干 [4-6] 细胞 。然而，血清因为批次之间的差异性影响体外培养细胞的可重复性。 为了培养质量可控，使用安全，重复性高的细胞产品，本项目选择了无血清无抗 生素成份的细胞培养体系，避免以往使用的含人或动物血清培养体系, 导致不同程度 的异种蛋白混入而引起的排异反应，以及抗生素残留对人体的影响。 新药治疗用生物制品1 类 9. 生产工艺的研究资料及验证资料 第 2 页 共11 页 本研究拟对不同培养基进行筛选，通过考察细胞