细胞工程思考题参考答案.docVIP

第一章 绪论课后习题答案 1. 动物细胞工程主要有哪些内容？这些技术有何用途？ 答：1. 组织和细胞培养技术2. 细胞融合与单克隆抗体技术3. 细胞核移植技术4. 胚胎工程技术 5. 干细胞技术6. 转基因技术7. 染色体工程 细胞工程的应用有：A. 单克隆抗体的应用：疾病诊断与治疗、微量大分子物资的检测、贵重生物活性物的分离与提纯、特殊疾病治疗、与药物交联治疗疾病；B. 转基因技术的应用：建立疾病的动物模型、品种改良和抗病育种、“乳腺生物发应器”、基因代替治疗、异种器官移植、基因功能研究；C. 细胞与组织替代治疗；D. 治疗人类不孕症；E. 优良品种繁育；F. 生产转基因家畜；G. 保护濒危动物。 追踪动物细胞工程研究与应用的必威体育精装版进展，并预测其发展趋势。 第二章 细胞培养 1、体外培养细胞有哪些类型？其生长特点有什么区别？ 答：体外培养的细胞根据其生长方式，主要分为贴壁生长型细胞和悬浮生长型细胞。离体细胞 必须贴附于底物上才能生长的细胞称为贴壁生长型细胞。有机体的绝大部分细胞必须贴附在某 一固相表面才能生存和生长。动物细胞培养中，大多数细胞必须贴附在固相表面才能生长，当 细胞布满表面后即停止生长。从生长表面脱落进入液体得细胞通常不再生长而逐渐退化，这种 细胞称为单层附壁细胞。贴壁生长的细胞在活体体内时，形态各异，而体外培养状态下则在形 态上比较单一而失去其在体内时原有的特征。 按照培养细胞的形态，主要可分为以下几类：成纤维细胞型、上皮型细胞、游走型细胞、多形 型细胞；少数细胞类型在体外培养时不需要附着于底物而于悬浮状态下即可生长，包括一些取 自血、脾或骨髓的培养细胞，如血液白细胞、淋巴组织细胞、某些肿瘤细胞、杂交瘤细胞、转 化细胞等，这些细胞在悬浮中生长良好，可以是单个细胞或为细小的细胞团，观察使细胞呈圆 形。由于悬浮生长于培养液中，因此其生存空间大，具有能够提供繁殖大量细胞、传代方便、 易于收获细胞等优点，易于大规模生产，便于过程的控制。 2、细胞系的生长过程包括哪些主要阶段？每一生长阶段各有什么特征？ 答：进行正常细胞培养时，不论细胞的种类和供体的年龄如何，细胞系的生长过程都经历原代 培养期、传代培养期和衰退期（或永生化）三个阶段。 ①原代培养期也称初代培养期，即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，一般持续1～4周，此期细胞呈活跃的移动，可见细胞分裂，但不旺盛。原代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动相似性较大，细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞，在软琼脂培养基中进行培养时，细胞克隆形成率很低，即细胞独立生存性差。 ②原代细胞生长一定时间后，如是贴附型细胞就会连接成片而铺满瓶底，这时需将原代细胞分开至多个新的培养瓶中，这个过程称为传代。初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系。此期细胞增殖旺盛，可见细胞分裂相，并能维持二倍体核型。传代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动发生较大改变。一般情况下当传代10～50次左右，细胞增殖逐渐缓慢，以至完全停止，细胞进入第三期。 ③衰退期的细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；细胞形态轮廓增强，最后衰退凋亡。在细胞生命期阶段，少数情况下，在以上三期任何一点(多发生在传代末或衰退期)，由于某种因素的影响，细胞可能发生转化。转化的标志之一是细胞可能获得永生性或恶性。细胞永生性也称不死性，即细胞获持久性增殖能力，这样的细胞群体称无限细胞系，也称连续细胞系。 3、每代细胞的生长曲线包括哪几个主要时期？各期细胞有何特点？ 答：每代细胞从开始接种到分离再培养，一般要经过以下阶段：潜伏期、指数(对数)生长期和停止期(平台期)。 ①细胞接种培养初期，历经悬浮、贴壁及生长加速的阶段。细胞接种培养 后，先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期。此时细胞胞质回缩，胞体呈圆球形。接着是细胞附着或贴附于底物表面上，称贴壁，贴壁出现标志悬浮期结束。细胞贴附于支持物后，会发生一系列变化，然后还要经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期。细胞处在潜伏期时，可有生长活动，基本无增殖，少见分裂相。潜伏期后，细胞分裂出现，并逐渐增多，标志细胞进入指数生长期。 ②又称对数期。此时细胞生长增殖旺盛，细胞成倍增长，活力最佳，最适合进行实验研究。细胞分裂相增多。（细胞分裂相数量可作为判定细胞生长旺盛与否的一个重要标志。） ③在细胞数量达饱和密度后，细胞停止增殖，进入停止期。此时细胞数量持平，故也称平台期。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动，可继续存活一段时间。该时期细胞形态轮廓增强，最后开始衰退死亡。 4、什么是原代培养与传代培养？原代细胞培养有哪些方法？各自的适用范围是什么？ 答：原代培养也称初代培养期，即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，一般持续1～4周。传代培养是指原代细胞生长一定时间后，如是贴附