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试验二 离体蛙心灌流试验
专业: 学号: 姓名:
一, 试验目的
学习离体器官(蛙心)灌流的方法;
观看理化因素对蛙心活动的影响;
二, 试验原理
蛙心的灌流 : 蛙心无养分性血管,离体之后采纳人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩,舒张,并维护较长时间,心肌的养分是通过心脏内膜液体的直接渗透而得;
1.
1. 任氏液:正常对比
含有 NaCl,CaCl2,KCl,NaH2PO4 , Na2HPO4
和蒸馏水,其电解质,晶体渗透压, pH值与蛙的组织液相近;2.0.65%NaCl 灌流:
受体
受体兴奋剂
效应
β1
肾上腺素
心率增快, 房室传导
去甲肾上腺素
加速,心肌收缩力加
M
乙酰胆碱
强;
心率减慢, 房室传导
减慢,心肌收缩力减
弱;
3.2%CaCl2 灌流:
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4.1%KCl
4.1%KCl 灌流:
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5.1:10000
5.1:10000 E
灌流
6.1:10000 Ach 灌流
心得安
β1 受体阻断剂,抑制肾上腺素与 β1 受体结合,使 E 不能发挥作用;
阿托品
M受体阻断剂,抑制 Ach减慢心率,加速房室传导,增加心房收缩力;
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三, 试验器材
离体蛙心
任氏液,l %KCl溶液,2%CaC12 溶液,0.65%NaCl溶液,1:10000 肾上腺素,1:10000乙酰胆碱,心得安,阿托品
四, 试验步骤
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离子试剂
任氏剂 0.65%NaCl
任氏液清洗
2%CaCl2
任氏液清洗
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1%KCl 任氏液
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药物试剂
任氏液清洗
E
心得安+E
任氏液清洗
Ach
任氏液清洗
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阿托品+Ach 任氏液
五, 结果与分析
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图 1 正常脉搏曲线
心率: 34 次/min 最大收缩力: 2.5g 最小收缩力: 1.1g
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图 2 0.65%NaCl 灌流脉搏曲线
心率: 35 次/min 最大收缩力:1.6g 最小收缩力:1.1g
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2+ 2+ 2+
分析:细胞外液中 Ca 浓度降低, 2 期 Ca 内流削减,胞浆中 Ca 削减,心肌收缩
力降低;
心率: 38 次/min 最大收缩力:3.5g 最小收缩力:1.1g
图 3 2%CaCl 2 灌流脉搏曲线
分析:心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关; 心肌肌浆网不发
+ 2+
达,储钙才能差,易受细胞外钙离子浓度高低影响;细胞外液中 Na 与 Ca 有竞
2+ 2+
争性抑制, 细胞外液 Ca 浓度上升, 细胞兴奋时内流 Ca 增加, 心肌收缩力增强;
慢反应细胞 4 期去极速度加快,心率增快;
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图 4 1%KCl 灌流脉搏曲线
+ 2+
心率: 21 次/min 最大收缩力:3.4g 最小收缩力:1.1g
+ +
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分析: K 与 Ca 在细胞膜上有竞争性抑制,细胞外液中 K 浓度上升, K抑制细胞
2+ 2+
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膜对 Ca 转运,因此进入细胞内 Ca
降低,心肌的兴奋—收缩耦联作用减小,心
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肌收缩力减弱;
心率: 35 次/min 最大收缩力:3.5g 最小收缩力:0.9g
图 5 肾上腺素灌流脉搏曲线
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2+
分析:肾上腺素与心肌细胞膜上的 β 1 受体结合,心肌细胞和肌浆网膜 Ca 通透
2+
性增强,肌浆中 Ca 浓度上升,心肌收缩力增强;而且肾上腺素使肌钙蛋白与钙
离子亲和力下降, 肌钙蛋白对钙离子的释放增强, 肌浆网膜摄取钙离子的速度加快,钠- 钙离子的交换增加,复极期向细胞外排出钙离子增多,心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显加强;
心率: 34 次/min 最大收缩力:2.5g 最小收缩力:1.1g
图 6 心得安+E 灌流脉搏曲线
分析:心得安是β 1 受体阻断剂,能够抑制肾上腺素与β
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