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AB0血型正、反血型鉴定技术操作规程  1.检测目的 用于检测患者血型，实施输血治疗和组织器官移植等。 2.检测原理（正定型法） 根据IgM类特异性血型抗体与红细胞上特异性抗原结合能够出现凝集反应的原理，用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红细胞在室温条件下反应，若被检红细胞出现凝集现象，表明被检红细胞上有与血型抗体对应的抗原。 3.标本要求 新鲜全血。 4.试剂 标准抗A、抗B血清。 5.操作步骤（玻片法） 5.1 标记：取一载玻片，用蜡笔画上直径2cm左右的两个圆圈，分别标记抗A、抗B。 5.2 抗血清：在玻片蜡笔圈内按标记所示分别滴加抗A、抗B标准抗血清各一滴。 5.3 红细胞：在抗A、抗B圈内加被检者全血各一滴。用玻棒将红细胞与抗体充分混匀，室温下放置18～30min（为防止天气干燥造成玻片干涸，可把试验玻片放在有湿纱布的盖盘中）。 5.4 血型判读：摇动玻片，肉眼观察玻片蜡笔圈内有无颗粒状凝集及凝集程度，判定阴性、阳性和阳性程度。阴性指视野中红细胞程均匀散布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞分散存在，无聚集靠拢现象。阳性时红细胞出现凝集。 6.质量控制 6.1 分型血清质量性能符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。 6.2 试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。 6.3 按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以6℃为最强，但为了防止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温内进行试验，36℃可反应减弱。 6.4 观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。 7.干扰因素 7.1 分型血清效价太低、亲和力不强； 7.2 受检者红细胞上抗原位点过少或抗原性减弱； 7.3 受检者血清中缺乏应有的抗-A/抗-B抗体； 7.4 各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集。部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体； 7.5 由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因； 7.6 血清中有意外抗体，如自身抗-I，常引起干扰； 7.7 老年人血清中抗体水平大幅度下降； 7.8 更换新批号抗血清或对试剂结果有怀疑时，可设定阳性、阴性和自身对照； 7.9 为避免交叉污染，尖吸管、玻棒只能一次性使用； 7.10 婴幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱； 7.11 有些疾病可能使红细胞定性出现困难，如：严重的肠道细菌感染；严重的细菌感染；血清中存在病理性冷凝集素与红细胞上抗原结合；部分高球蛋白和异常高球蛋白血症患者； 7.12 输入异型血或做过与受者血型不同的异体骨髓器官移植的病人在血型坚定时可能出现混合外观。