作物遗传育种作物育种的基本原理遗传实验报告册.doc

新 疆 农 业 大 学 农 学 院 遗传实验报告册 植物遗传育种系 2009年9月1日 新 疆 农 业 大 学 实 验 报 告 课 程: 院 系: 班 级: 姓 名: 成 绩: 评阅教师: 实验名称：植物根尖染色体有丝分裂行为观察及制片 一、实验目的 1、掌握植物根尖染色体制片技术，奠定细胞遗传学的研究技术； 2、通过对植物根尖染色体的观察，掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。 实验原理 有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式，细胞分裂过程中，核内染色体准确地复制，并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去，使子细胞和母细胞的遗传组成一样，保证了植物细胞的遗传性状的一致。各种生长旺盛的植物组织中，如根尖组织、茎尖组织、愈伤组织等，都进行着细胞的有丝分裂。 有丝分裂期在整个细胞周期中所占的时间相对较短，因此要在细胞分裂的适当的时候取材，希望观察到更多分裂相，尤其是有丝分裂中期相，通常可以通过对植物材料进行预处理，抑制和破坏纺锤丝的形成，从而得到更多的分裂相；同时，预处理还可以改变细胞质的粘度，促使染色体缩短和分散，便于压片和观察。 植物细胞的细胞壁对细胞的形态和结构起支撑和保护作用，分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体，因此在压片之前需要采用设当的方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离，这个过程称为解离。同时，解离也可适当清除部分细胞质，使细胞质背景趋于透明化，便于在显微镜下观察染色体的形态特征和变化特点及进行染色体计数。 三、实验材料 大蒜(2n=16)、洋葱鳞茎(2n=16)、蚕豆（2n=12） 四、实验仪器、用具及药品试剂 （一）仪器用具 显微镜、恒温培养箱、冰箱、天平、刀片、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、铅笔、量筒、试剂瓶、烧杯； （二）试剂药品 碱性品红、冰乙酸、无水乙醇、苯酚、浓盐酸、山梨醇、蒸馏水； 实验步骤 （一）材料准备 大蒜根尖：将大蒜置于盛有清水的小烧杯上，根部与水接触，20-25℃光照条件下培养2-3天，待根长1-2cm时，于上午9:00-11:00剪下根尖备用。 （二）预处理 为了获得较多的中期分裂相的细胞，同时使染色体缩短和分散，可对根尖进行预处理，将根尖浸在蒸馏水中，置于1-4℃低温下，材料不可结冰，处理24小时。 固定 经过预处理的材料用蒸馏水冲洗干净，用卡诺氏固定液固定24小时，固定后的材料若不立即使用，可置于95%和80%酒精中各半小时，再换到70%的酒精中，4℃保存。 （四）解离 固定好的材料用蒸馏水冲洗干净后，放入1N盐酸溶液中，在60℃下解离6-20分钟，以便胞间层的果胶类物质解体，使细胞易于分散，便于压片。 （五）染色和制片 将解离好的材料用蒸馏水冲洗后，取小段根尖放在洁净的载玻片上，用刀片切去伸长区，只留下1-2mm的分生组织，滴一滴染色液，盖上盖玻片，用滤纸吸干多余的染色液，并用铅笔的橡皮头垂直轻敲，使根尖细胞分散均匀。 （六）镜检 将制备好的片子置于显微镜的载物台上，先用低倍镜寻找有分裂相的细胞，再转换到高倍镜下观察各时期染色体的行为和特征。 六、实验作业 1、制作细胞有丝分裂各时期图像清晰的片子1-2张。 2、描绘显微镜下所观察到的细胞有丝分裂过程中各时期的图像，并简要说明染色体的行为特征。 新 疆 农 业 大 学 实 验 报 告 课 程: 院 系: 班 级: 姓 名: 成 绩: 评阅教师: 实验名称： 植物细胞减数分裂观察及制片 一、实验目的 1、学习花粉母细胞涂抹制片技术； 2、观察植物减数分裂各个时期染色体的变化特征。 二、实验原理 减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的有丝分裂。它包括连续两次的细胞分裂阶段：第一次分裂为染色体数目的减数分裂，第二次分裂为染色体数目的等数分裂。两次分裂可根据染色体变化特点各分为前期、中期、后期和末期，由于第一次分裂的前期较长，染色体变化比较复杂，故其前期又可分为五个时期。 在减数分裂的整个过程中，同源染色体之间发生联会、交换和分离，非同源染色体之间进行自由组合。最终分裂为染色体数目减半的四个子细胞，从而发育为雌性或雄性配子（n）。雌雄配子通过受精又结合成为合子，发育为新的个体，这样又恢复了原有的染色体数目（2n）。 由于不同雌雄配子染色体的重新组合，产生了大量的遗传变异