临床微生物学和微生物学检验.pptx

抗菌药物敏感性试验 ;教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生 实验课时：4学时 课程类型：专业实验课 课程要求：必修 每组人数：2人;实验目的和要求;实验内容;一、常用抗菌药物敏感性试验与耐药检测方法介绍;二、纸片扩散法（K-B法） ;;方法： 菌液制备：挑取孵育16-24h的血平板上数个菌落置于生理盐水管中，校正浓度至0.5麦氏标准； 涂布接种：无菌棉拭蘸取菌液，在试管壁旋转挤去多余菌液后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转平板60o，最后沿平板内缘涂抹1周； 贴含药纸片：平板在室温下干燥3-5min，用无菌镊子将含药纸片紧贴于琼脂表面，各纸片中心相距应大于24mm，纸片距平板内缘应大于15mm； 孵育：35oC 16-18h，量取抑菌圈直径。;结果判读： 用刻度尺量取抑菌圈直径，根据CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）标准判读结果； 报告：细菌对该抗生素是 敏感（susceptible，S）； 耐药（resistant，R）； 还是中介（intermediate，I）。;;表1　金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验评价结果;三、肉汤稀释法 ;方法： 试管编号：取26只试管排成两排（测试菌排，质控菌排）每排13支编号。另取3支试管，分别标记上“肉汤对照”、“测试菌生长对照”和“质控菌生长对照”等对照。 抗菌药物稀释：用MH肉汤倍比稀释抗菌药物至13管，稀释后使每管含抗菌药物稀释液2ml。 肉汤对照、测试菌生长对照、质控菌生长对照管：分别加入MH肉汤2ml。;方法： 菌液制备：生理盐水校正测试菌和质控菌至0.5麦氏比浊标准，再用MH肉汤稀释到107CFU/ml； 加菌液：用微量加样器取0.1ml稀释菌液由低到高加于各排试管中，其最终的接种量为5×105 CFU/ml。测试菌排、测试菌生长对照管加测试菌液；质控菌排、质控菌生长对照管加质控菌液。 孵育：35oC 24h观察结果。;;;;9、青少年是一个美好而又是一去不可再得的时期，是将来一切光明和幸福的开端。。8月-218月-21Wednesday, August 18, 2021 10、人的志向通常和他们的能力成正比例。23:57:0223:57:0223:578/18/2021 11:57:02 PM 11、夫学须志也，才须学也，非学无以广才，非志无以成学。8月-2123:57:0223:57Aug-2118-Aug-21 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。23:57:0223:57:0223:57Wednesday, August 18, 2021 13、志不立，天下无可成之事。8月-218月-2123:57:0223:57:02August 18, 2021 14、古之立大事者，不惟有超世之才，亦必有坚忍不拔之志。18 八月 202111:57:02 下午23:57:028月-21 15、会当凌绝顶，一览众山小。八月 2111:57 下午8月-2123:57August 18, 2021 16、如果一个人不知道他要驶向哪头，那么任何风都不是顺风。2021/8/18 23:57:0223:57:0218 August 2021 17、一个人如果不到最高峰，他就没有片刻的安宁，他也就不会感到生命的恬静和光荣。11:57:02 下午11:57 下午23:57:028月-21