Imageproplus使用指南要点.pdf

Imageproplus 的主要用途是分析测量图象。 1.基本操作 2.AOI 技巧 3.AOI 技巧续 4.编制宏操作 5.计数 6.校正标尺 7.几何测量 8.图象分析策略 9.其他有趣的功能 10。讨厌的光密度 11.免疫组化光密度图片的测量 12.免疫组化光密度图片的自动测量 13.荧光照片的测量 14.双染料染色照片的合成方法打开 ipp 后的界面是这样的，该从何处下手呢 ? 这张照片中的黄色部分是免疫组化染色的阳性表达成分。 处理目标是通过测量图片中黄 色部分的 黄 度来反映相应蛋白表达的的 量 。对该图片进行观察，可以看到图片中主要有 三种主要颜色，一是染成蓝色的细胞核，二是呈现出黄色的胞浆，三是细胞间的空隙区域， 呈现出浅蓝色， 是为背景。 所以首先要把图片中呈现黄色的区域给挑选出来， 然后才是测量 这些挑出来的区域的各种测量参数，如面积、平均半径、周长、光密度等等。 这部分需要挑出来进行测量的区域是我们最感兴趣的地方，叫作 AOI(area of interest) 。 AOI 是 IPP 中最有用最重要的概念。然而在选择 AOI 之前必须转换图象 intensity 格式。校 正光密度单位的操作要在打开第一张图片后立即进行。将光密度单位设定为 system 之后就 不必再对后面的每一张照片都进行光密度校正了。在默认的 intensity 格式中，是图片灰度， 越黑数值越小， 越白数值越大。 而实际上我们测量的染色强度是光密度，染色越深，光密度 值越大。 如果不进行光密度单位的转换， 测量的数值将完全是错误的。 转换光密度单位的方 法如下 :点击 :measure--carliberation--intensity ，调出 intensity 校正窗口。然后在窗口中点 new 按纽， 再点一下下面的 std optical density 选项，这时可以看到窗口中的直线变成了反向的曲 线。然后还要点一下最上面的 system 按纽。最后点 close 关闭窗口。这样就把程序系统的灰 度单位转换成了光密度单位。 然后就是如何能够准确地选取 AOI 就是使用 IPP 的关键操作。一旦准确地选取了 AOI ， 下面的测量分析就好办了。 在其他的测量软件中， 选择这种不规则的区域一般只能用手拖着 鼠标来画，而在 IPP 程序里，可以通过设置颜色范围让电脑来帮助你选择这些不规则区域， 这样的选择就准确多了。可以说，使用 IPP 的要点就是灵活地使用各种 AOI 工具准确地把 那些需要测量的区域给挑选出来。对不同的图片，需灵活地使用各种适当的 AOI 工具，先 用最简单的，当然， 简单的工具只能作简单的事， 就这张图片来说，用简单工具选黄色有点 困难，我们先用它来选择蓝色的细胞核吧。点击 measurecount/size,弹出分类测量窗口。 在窗口中选中 manual,再点击 select color,弹出颜色选择窗口 segmentation,这个工具是 IPP 最有特色的颜色选取工具之一。用好这个工具是使用 IPP 的要点。 对于目标颜色鲜明的图片，用吸管工具是最简单的。点一下吸管图标，在目标区域点一 下，就可以选中该点的颜色， 当然一下是不可能完全选中所需要指定的全部区域， 可以在未 选中的地方接着再点， 这样多次选取， 直到把想选中的区域全部选中为止。 在这张示例图中， 选中的蓝色