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Imageproplus 的主要用途是分析测量图象。
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2.AOI 技巧
3.AOI 技巧续
4.编制宏操作
5.计数
6.校正标尺
7.几何测量
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14.双染料染色照片的合成方法打开 ipp 后的界面是这样的,该从何处下手呢 ?
这张照片中的黄色部分是免疫组化染色的阳性表达成分。 处理目标是通过测量图片中黄
色部分的 黄 度来反映相应蛋白表达的的 量 。对该图片进行观察,可以看到图片中主要有
三种主要颜色,一是染成蓝色的细胞核,二是呈现出黄色的胞浆,三是细胞间的空隙区域,
呈现出浅蓝色, 是为背景。 所以首先要把图片中呈现黄色的区域给挑选出来, 然后才是测量
这些挑出来的区域的各种测量参数,如面积、平均半径、周长、光密度等等。
这部分需要挑出来进行测量的区域是我们最感兴趣的地方,叫作 AOI(area of interest) 。
AOI 是 IPP 中最有用最重要的概念。然而在选择 AOI 之前必须转换图象 intensity 格式。校
正光密度单位的操作要在打开第一张图片后立即进行。将光密度单位设定为 system 之后就
不必再对后面的每一张照片都进行光密度校正了。在默认的 intensity 格式中,是图片灰度,
越黑数值越小, 越白数值越大。 而实际上我们测量的染色强度是光密度,染色越深,光密度
值越大。 如果不进行光密度单位的转换, 测量的数值将完全是错误的。 转换光密度单位的方
法如下 :点击 :measure--carliberation--intensity ,调出 intensity 校正窗口。然后在窗口中点 new
按纽, 再点一下下面的 std optical density 选项,这时可以看到窗口中的直线变成了反向的曲
线。然后还要点一下最上面的 system 按纽。最后点 close 关闭窗口。这样就把程序系统的灰
度单位转换成了光密度单位。
然后就是如何能够准确地选取 AOI 就是使用 IPP 的关键操作。一旦准确地选取了 AOI ,
下面的测量分析就好办了。 在其他的测量软件中, 选择这种不规则的区域一般只能用手拖着
鼠标来画,而在 IPP 程序里,可以通过设置颜色范围让电脑来帮助你选择这些不规则区域,
这样的选择就准确多了。可以说,使用 IPP 的要点就是灵活地使用各种 AOI 工具准确地把
那些需要测量的区域给挑选出来。对不同的图片,需灵活地使用各种适当的 AOI 工具,先
用最简单的,当然, 简单的工具只能作简单的事, 就这张图片来说,用简单工具选黄色有点
困难,我们先用它来选择蓝色的细胞核吧。点击 measurecount/size,弹出分类测量窗口。
在窗口中选中 manual,再点击 select color,弹出颜色选择窗口 segmentation,这个工具是 IPP
最有特色的颜色选取工具之一。用好这个工具是使用 IPP 的要点。
对于目标颜色鲜明的图片,用吸管工具是最简单的。点一下吸管图标,在目标区域点一
下,就可以选中该点的颜色, 当然一下是不可能完全选中所需要指定的全部区域, 可以在未
选中的地方接着再点, 这样多次选取, 直到把想选中的区域全部选中为止。 在这张示例图中,
选中的蓝色
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