传染病诊断技术国产化和产业化的必要性许文波.pptxVIP

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传染病诊断技术国产化和产业化的必要性许文波会计学对于传染病的预防、控制和治疗,最关键的是对疾病的早期诊断。无论是细菌性的还是病毒性的传染病,快速、准确地诊断出传染病病因和传播途径对于传染病的预防、控制尤其重要一些新出现的传染性疾病,尤其是病毒性传染病的发生频率越来越高,给人民的健康安全带来严重威胁。新发和突发传染病病毒诊断用的标本病毒分离鉴定所用的细胞病毒实验室检测类型诊断试剂国产化和产业化的展望临床中的病毒病诊断分子流行病学在病毒病诊断中的应用国家麻疹、脊灰和HFMD实验室网络和研究领域1.新发和突发传染病Emerging and re-emerging viral diseases :一种新的疾病以前没有鉴定出来已经知道的疾病的发病率或地理分布明显增加或扩大已经存在的病毒发生重组形成一个新病毒SARS-coronavirusNipah virusHendra virusAustralian bat lyssavirusMenangle virusJapanese encephalitis virusChikungunya virusDengue virusesAdv14Adv11变异株 (和Adv14重组) Enterovirus 712009-H1N1 Flu (Swine Flu) 病原微生物危险 感染性的致病因子,无论是直接感染人类,还是间接地散播到环境中去,对人类、动物或植物都是一个现实的或潜在的危险。AnimalsPlantsHumansChernobyl2.病毒诊断所用的标本-a -标本质量对于病毒诊断至关重要对于诊断急性病毒性感染最好是采集于疾病发生的部位、或传播部位的标本。标本(除血清外)运输应在4℃冷藏,如果超过24小时,标本应保存于-70℃或更低。血清学诊断的急性期标本通常应在发病最初几天获得,恢复期标本在2-4周后获得。一些病毒感染也可从唾液或尿中检测到抗体。2.病毒诊断用的标本-b 标本的正确收集、处理至关重要-1(成功的第一步) ?血液、CSF、尸检组织标本, 粪便标本,咽拭子、 鼻咽拭子和下呼吸道分泌物吸取液 病毒分离和用于提取RNA标本的采集时间,位置及质量 直接关系到能否成功分离到病毒或RNA的活性,而标本 保存与运输不当也会影响病毒的分离。 为提高病毒的分离率。在用于病毒分离的样品采集的 数量、类型和地点方面,实验室与流行病医生应达成 共识。一般来说,病毒分离用样品应与血样同时采 集,以便做血清学诊断。3.病毒分离鉴定所用的细胞-1病毒实验室维持良好的细胞系特别重要细胞系经常被支原体污染 支原体污染会严重影响细胞的培养,因为这种污染不抑制细胞生长,即使在显微镜下观察也很难察觉。与细菌和真菌相比,支原体污染比较容易蔓延到其他培养中,而且很多对细菌污染有效的抗生素,支原体却并不敏感。 树立“预防为主”的思想保证细胞来源干净确保基质和器材无菌严格无菌操作细胞培养时避免交谈操作结束时消毒台面每传15代的细胞应更换所有细胞培养材料丢弃前应高压消毒3. 病毒分离鉴定所用的细胞-2L20B adenovirus CPERD-A adenovirus CPEVERO-CPE-RVVERO CELL LINE 4. 病毒实验室检测类型每种方法各有优势,依据病毒来定检测策略病毒复制的检测抗原检测核酸检测血清学抗体检测4.病毒实验室检测类型-病毒实验室诊断方法检测抗体/抗原蛋白印迹免疫荧光ELISA/HI/PA每种方法各有优势,依据病毒来定检测策略中和试验基因芯片检测病毒中和试验病毒分离ELISA免疫荧光电镜检测核酸实时荧光定量PCRRT-PCRNew molecular tools for epidemiologystudies and diagnosisLAMP基因芯片套式PCR病毒复制的检测 1) 细胞病变-病毒分离和鉴定 2) 血吸附实验 3) 干扰试验。 4) 其它检测方法 5) Shell viral culture 6) 基因工程细胞学 7 ) 电子显微镜 8 ) 标本的直接检测 9 ) 检测固定的细胞 10)感染型细胞的检查 11)光学显微镜 12) 细胞学检查 13) 组织学检查 14)核酸检测病毒包涵体抗 原 检 测-1用于病毒抗原检测的方法包括IFA、IHC、ELISA优点: 可在接到标本几个小时内获得结果,检测不 需活病毒(特别是标本运输时间较长时) 在下列情况可进行抗原检测 有病毒抗原表达; 有特异性抗体; 抗原有变异,但在不同株之间有共同抗原位点; 抗原在运输贮藏时稳定。抗 原 检 测-2标本:呼吸道(鼻咽拭子或鼻咽洗液,气管呼吸道灌洗液)病毒:呼吸道合胞病毒,流感病毒A ,B。副流感病毒1-3 麻疹和腺病毒,风疹 标本:皮肤和黏膜拭子病毒:水痘病

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