家畜组织胚胎学--1绪论.ppt

家畜组织胚胎学;第一章 绪论;第一节 家畜组织胚胎学的研究内容和意义;胚胎学〔embryology〕是研究动物个体胚胎发育的科学。 胚胎学的研究内容包括配子发生、受精、卵裂、原肠胚和神经胚形成、胎膜和胎盘以及器官发生等。;组织胚胎学属于动物科学和医学专业的专业根底课。只有掌握了动物的正常形态结构和胚胎发育规律，才能进一步了解动物的生理活动规律，并利用这些规律去合理地饲养、繁殖和改进动物以及防治各种疾病。;第二节 组织胚胎学研究方法及根本原理;1.组织学制片技术 一般是先把组织制成薄片，最常用的是石蜡切片，其制备方法是： ①取材与固定：把新鲜组织放到甲醛溶液等固定液中，使蛋白质等成分迅速凝固，尽可能保持其活体时的结构状态。 ②脱水与透明：为使石蜡浸入组织内，把固定好的材料用乙醇逐级〔70%-100%〕脱水。用二甲苯或乙醚等石蜡溶剂使组织浸透，便于浸蜡。;③浸蜡与包埋：把组织放入融化〔58-60℃〕的石蜡中，进行浸透和包埋成蜡块，目的是使石蜡进入细胞间隙和细胞内，以增加组织的硬度，便于切片。 ④切片与贴片：将蜡块用切片机切成5-10μm厚的组织切片，并铺展粘到载玻片上。;⑤染色与封固：把粘好的切片脱蜡后，用适当的染料进行染色。染色后，再经脱水和透明，最后把组织用树胶和盖片封片。 除了石蜡切片外，血液可以制成血涂片，疏松结缔组织和肠系膜等薄层组织可制成铺片，骨组织可制成磨片,然后固定和染色。 ; 最常用的染色方法是苏木精〔hematoxylin〕和伊红〔eosin〕染色的染色方法，简称H.E.染色。 苏木精是碱性染液，可以使细胞核内的染色质和细胞质中的核糖体等成分染成蓝紫色，故这些成分被说成是嗜碱性着色的。伊红是酸性染料，可使多数细胞的细胞质染成粉红色，这些细胞质被称为嗜酸性的。对碱性和酸性染料亲和力都不强的结构，称为嗜中性的。;;染色方法;镀银染色，显示大脑皮质神经元;氯化金染色，显示运动终板;Hemalum染色，显示心肌纤维及闰盘;2、组织化学技术; 1．一般组织化学术 是利用化学试剂与组织内的某些物质进行化学反响，在局部形成能够在显微镜下观察到的沉淀物。例???，过碘酸雪夫氏反响〔periodic acid chiff’s reaction, PAS反响〕的根本原理是通过过碘酸的氧化作用，使多糖生成醛基，后者与雪夫氏试剂中的无色碱性品红反响，在反响部位形成紫红色沉淀，从而证明细胞内含有糖原或粘多糖成分。 　　 HIO4 Shiff试剂 多糖 醛 紫红色沉淀物 〔氧化〕 〔碱性品红〕;PAS反响，显示小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒;⒉ 免疫组织化学术〔immunocytochemistry) 利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方法，那么为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽和蛋白质。;组织化学术;原位杂交，显示脐静脉内皮细胞的心房钠尿肽阳性; 活体组织研究法;光学显微镜〔light microscope LM〕 电子显微镜 〔electron microscope EM〕;一．光学显微镜;显微镜下常用的长度单位;光学显微镜的分类;光镜;光镜;大鼠附睾上皮细胞微丝〔肌动蛋白〕及细胞核;二 电子显微镜技术 常用的电镜有透射电镜和扫描电镜两种。 与光镜比较，电镜的根本原理是以电子束代替光线，以电磁透镜代替光学透镜。;透射电镜〔TEM〕的分辨率已到达左右，可放大几万到几十万倍。 其工作原理是，电子束透过样品后，投射到荧光屏上，形成物像。由于电子易散射和被物体吸收，所以必须制备超薄切片〔90-100nm〕。;电镜样品的制备过程： 取小材料块〔1mm3以内〕用戊二醛和锇酸双重固定→环氧树脂包埋→超薄切片机切片→铅铀重金属电子染色→电镜观察。 被金属盐所染的部位，因透过的电子束少而在荧光屏上显得暗，称为电子密度高，反之那么称为电子密度低。;透 射 电 镜;电镜;扫描电镜〔SEM〕 是用极细的电子束在样品外表进行扫描并用特定的探测器收集所发生的二次电子，形成电信号传送到显像管，在荧光屏上显现出物体外表的立体图象。 扫描电镜的样品制备方法： 将较大的组织块用戊二醛和锇酸双重固定，经脱水和枯燥后，再于样品外表上喷涂一薄层金，以增加二次电子数。;电镜;电镜;电镜技术;电镜技术;第三节 家畜组织胚胎学的研究方法;形态联系机能;平面联系立体;平面联系立体;平面联系立体;平面联系立体;平面联系立体;平面联系立体;静态与动态;共性联系个性;课后习题