新项目方法能力验证报告(水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法).pdf

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XXXX 有限公司 新项目方法验证能力验证报告 项目名称: 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法 HJ 347.2-2018 负责人 : 审核人 : 日 期: 报告编号: 第 1 页 共 7 页 水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法 HJ 347.2-2018 方法验证能力验证报告 1、方法依据及适用范围 本报告依据:水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法 HJ 347.2-2018 制 定。 该方法的适用范围:地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠 菌群的测定。 2、定义 将样品加入含乳糖蛋白胨培养基的试管中,37℃初发酵富集培养,大肠 菌群在培养基中生长繁殖分解乳糖产酸、产气,产生的酸使溴甲酚紫指示 剂由紫色变为黄色,产生的气体进入倒管中,指示产气。44.5℃复发酵培养, 培养基中的胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长,最后产气的细菌确定为 是粪大肠菌群。通过查MPN 表,得出粪大肠菌群浓度值。 3 、主要仪器、设备及试剂 4.1 培养基与试剂 4.1.1 乳糖蛋白胨培养液 蛋白胨 10g 乳糖 5g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL 溴甲酚紫乙醇溶液(ρ=16g/L ) 1mL 报告编号: 第 2 页 共 7 页 贮备培养基:将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠置于 1 000 mL 蒸馏水 中加热溶解,用氢氧化钠溶液(15.3.2)或盐酸溶液(15.3.3)调 pH 为 7.2~ 7.4,再加入1 mL 溴甲酚紫乙醇溶液(p=16g/L ),充分混匀,分装于装有 倒管的试管中,置高压蒸汽灭菌器中,以115℃灭菌 20 mi ,贮于冷暗处。 4.1.2EC 培养基 胰胨 20g 乳糖 5g 胆盐三号 1.5g 磷酸氢二钾(K2HPO4 ) 4g 磷酸二氢钾(KH2PO4 ) 1.5g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL 将上述成分加热溶解,然后分装于含有玻璃倒管的试管中。置高压蒸 汽灭菌器中,115℃灭菌20mi ,灭菌后pH 应为6.9 。 4.1.3 无菌水℃取适量实验用水,经 121℃高压蒸汽灭菌 20 mi ,备用。 4.1.4 硫代硫酸钠(Na S O 5H O )。 2 2 3 2

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