7微生物工业菌种与培养基.pptx

第一篇 微生物工业菌种与培养基 第一章 菌种与种子扩大培养;（1）所需培养基易得，价格低廉； （2）培养和发酵条件温和（糖浓度、温度、pH、溶解氧、渗透压等） （3）生长速度和反应速度较快，发酵周期短 （4）单产高 （选择野生型、营养缺陷型或调节突变株） （5）抗病毒能力强 （6）菌种纯粹，不易变异退化，稳定性好 （7）菌体不是病源菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素（包括抗生素、激素和毒素），保证安全;二、工业上常用的微生物; 1、常用的细菌; 乳酸杆菌 应用：乳酸、干酪、奶子酒、发面、泡菜、酸奶等的制作 ;枯草芽孢杆菌 应用：生产淀粉酶;2、酵母菌;;啤酒酵母;面包酵母;3、霉菌;应用：酱油、酱类（淀粉酶）;米曲霉 应用：产糖化酶和蛋白酶、主要用于酿酒制曲和酱油制曲;应用：生产甲义丁二酸; 毛 霉 应用：可以产生蛋白酶，我国多用于豆腐乳、豆豉等的制作;根霉 种类：米根霉、华根霉、少根根霉、爪哇根霉 应用：酿酒;;青霉菌;应用：生产青霉素、葡萄糖氧化酶; 4、放线菌;三、生产用菌种的保藏及选育; 3、菌种保藏的方法：斜面保藏法、矿物油保藏法、砂土保管保藏法、真空冷冻干燥法、冷冻法、液态真空干燥法、琼脂穿刺封口保藏法、曲法保藏、麦粒保藏法、无水硅胶保藏法。 （1）斜面保藏法： 在4℃左右的冰箱保藏，每隔一定时间进行移植培养后再继续保藏，如此反复。 优点：方法简单、存活率高，具有一定的保藏效果。 缺点：菌种仍有一定的强度的代谢活动条件，保存时间不长，传代多，菌种容易变异。 适用菌种：细菌、酵母、防线菌、霉菌;（2）矿物油保藏法 将生长好的斜面在无菌条件下倒入已灭菌的液体石蜡，油层高于斜面末端1cm，然后放于冰箱中保存。 适用菌种：适用于除细菌外的其它菌种 （3）砂土管保藏法 利用土壤颗粒对微生物起保护作用，提高微生物的存活率。其包括砂土制备和真空抽干两步。 适用菌种：产孢子的微生物，对于一些对干燥敏感的细菌（奈氏球菌、弧菌、假单???杆菌）以及酵母不适用。; （4）真空冷冻干燥法 先在菌悬液加入保护剂（如：脱脂牛奶、血清等）然后在较低温度下使成冻结状态，最后减压抽干。 特点： 它是菌种保藏中最有效的一种方法。保存期可达一年至数十年之久，并且存活率高，变异率低。单使手续麻烦，需要一定的设备。 适用菌种：对于不长孢子或长的很少孢子的真菌保藏效果不佳。;（5）其他保藏方法 冷冻法：分低温冷冻（－20 ℃）与超低温冷冻（－196 ℃）两种。适用于细菌、真菌、病毒等的保藏 液态真空干燥法：菌体在恒温液态条件下进行真空干燥。适用于包括细菌、病毒，特别适用于冷冻干燥保藏效果不佳的菌种。 琼脂穿刺封口保藏法：适用于不产孢子细菌的保藏 ;曲法保藏：将麸皮与水按比例混合，灭菌后接入菌种，待孢子长成后即为成曲。将试管放入盛有氯化钙的干燥器中，干燥后低温保藏。适用于有大量孢子的霉菌和某些放线菌的保藏。 麦粒保藏法：麦粒灭菌后接入菌液，培养有菌丝或孢子时，置通风、避光、干燥处保藏。适用于一些放线菌、芽孢杆菌、酵母的保藏。 无水硅胶保藏法：将细胞悬浮液和等体积的脱脂灭菌牛奶混匀，加入装有无水硅胶的试管中，然后将试管放于干燥器内，室温或4 ℃保藏。对于细菌和真菌效果都较好。 ;国内外菌种保藏机构; 1、我国的微生物菌种保藏机构;2、国外主要的微生物菌种保藏机构;（二）菌种选育;;;3、新诱变因子及诱变技术;D、细胞工程育种 E、基于代谢调节的育种； 组成型突变株的选育、抗分解调节突变株的选育、营养缺陷型等等 F、代谢工程育种 改变代谢途径、扩展代谢途径、转移或构建新的代谢途径;G、基因重组育种； H、蛋白质工程育种； 定点突变技术、定向进化技术（易错PCR、DNA随机重组）； J、组合生物合成育种； ;;四、防止菌株衰退的措施;2、防止菌种衰退的方法;3.菌种复壮方法; 第二节 种子扩大培养;3、菌体浓度及总量能满足大容量发酵罐 接种量的要求 4、无杂菌污染，保证纯种发酵 5、菌种适应性强，能保持稳定的生产能力;二、种子扩大培养的任务和培养类型;;2.培养类型;;大规模工业生产的培养方法及特点：;B、液体培养 浅盘液体培养 液体深层培养： 目前几乎所有的好气发酵均采用此法； ;C、载体培养：用天然（或人工）多孔材料代替麦麸之类固态基质作微生物生长的载体，营养成分可严格