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慢病毒包装实验的要点:
1:良好的293FT细胞状态是转染成功的首要因素,细胞代数不宜超过30代;
2:细胞铺板需均匀,避免细胞成团,影响转染效率;尽量多的细胞转入质粒,产生的病毒就越多;
3:细胞换液和共转染时,动作要轻柔避免细胞漂浮。尽量少的细胞死亡,产生的病毒就越多;
实验前要准备的 \t /_blank试剂、耗材和 \t /_blank仪器;
试剂准备:10%灭活胎牛血清+90%DMEM配好的完全培养基 ,0.25%胰酶,PBS,TRL转染试剂,包装质粒,目的质粒,无血清培养基。
耗材准备:10cm细胞培养皿,6孔细胞培养板,吸头规格1ml、200ul、
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